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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC不出峰
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eternalxin

木虫 (正式写手)

[求助] HPLC不出峰 已有6人参与

化合物结构（米拉贝隆）
HPLC不出峰
色谱条件：目前无手性柱，用的C18  网上查到的论文里的，另外查到的两相的方法，仪器限制做不了
HPLC不出峰-1
210nm 和 280nm都不出峰  走了60min
流动相溶样  岛津LC-16 SPD-16 紫外检测器  单泵 手动进样  无其他仪器可用
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1楼 2015-07-18 17:13:44
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

xuchao7447

木虫 (著名写手)

超

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先不要接柱子，直接走样品看看你这个物质的最佳吸收到底在哪里
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生活就是如此
6楼2015-07-20 10:25:59
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普通回帖

yueleihao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
上图，是这种物质无峰还是所有无峰，其他样品有无峰
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明月兮，沟渠乎
2楼2015-07-18 21:07:57
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先用高有机相（80～90%)走一针看看，确定出峰了再往回调。

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3楼2015-07-18 23:13:45
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kf1009

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这种手性C18是有可能分离，pH6.0缓冲体系，25%的甲醇洗脱力度太小，不如你用75%的甲醇试试，注意你的缓冲盐浓度较高，注意水相和有机相的互溶性。
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快乐不需要走遍天涯去寻找，只需播一粒种子在脚下。
4楼2015-07-19 09:49:59
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ethernet3399

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
感谢参与，应助指数 +1
这个化合物极性较小，而且溶液pH近中性，化合物可能只有一个仲胺带一个正电荷，所以极性小。25%甲醇洗脱不出的。个人觉得如果要分析该物质，没有必要局限文献的方法换成有TFA条件，5-95甲醇有一个梯度

[ 发自小木虫客户端 ]
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5楼2015-07-19 17:35:41
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黑里透白

银虫 (初入文坛)
有苯环，必然会有吸收，无峰有可能是在色谱柱中未洗脱出来，先用梯度运行找到峰再说吧
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7楼2015-07-20 14:53:46
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da1234mao

铁虫 (著名写手)
感觉波长不太对，你弄成254nm看看，
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8楼2015-07-21 08:22:55
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eternalxin

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by ethernet3399 at 2015-07-19 17:35:41
这个化合物极性较小，而且溶液pH近中性，化合物可能只有一个仲胺带一个正电荷，所以极性小。25%甲醇洗脱不出的。个人觉得如果要分析该物质，没有必要局限文献的方法换成有TFA条件，5-95甲醇有一个梯度
...

确实没有洗脱出来，甲醇调成75%就出峰了，多谢
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9楼2015-07-21 09:52:41
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eternalxin

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by kf1009 at 2015-07-19 09:49:59
这种手性C18是有可能分离，pH6.0缓冲体系，25%的甲醇洗脱力度太小，不如你用75%的甲醇试试，注意你的缓冲盐浓度较高，注意水相和有机相的互溶性。

确实没有洗脱出来，甲醇调成75%就出峰了，多谢
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10楼2015-07-21 09:52:53
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