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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 新手求问UPLC流动相选择
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yuzhihao11

铜虫 (初入文坛)

[求助] 新手求问UPLC流动相选择 已有4人参与

本人色谱新手，最近用C18柱分离生物样品，最初用纯水+纯乙腈分离，但效果不好。现在考虑用纯水+纯异丙醇，想问这个条件对泵和柱子有影响吗？因为好像文献上没见过有人混合水和异丙醇
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1楼 2015-07-17 07:41:42
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klicking

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by yuzhihao11 at 2015-07-19 02:29:19
我尝试了进0 ml 样品，这样应该没有样品从进样系统流出进入色谱柱，但是污染物峰仍在，所以我怀疑要么是solvent manager要么是色谱柱受污染，但应该是色谱柱受污染的概率大一点...

你的操作是对的，但是进样0 μl，不同仪器操作原理不一样。例如Agilent的，即使进样0 μl，也有阀切换的，这样如果是进样阀污染，则会同样出峰。如果是溶剂管理器污染，只能多冲洗系统才能除去了。请问你的仪器是Waters H-Class的么？
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7楼2015-07-19 08:50:36
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至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
C18色谱柱的话，可考虑水中加入三氟乙酸、醋酸铵等或缓冲盐，有机相还是建议用乙腈
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归零
2楼2015-07-17 07:59:48
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天空下的傻瓜

铁杆木虫 (知名作家)

来自猩猩的我
不是不能用、是粘度太大压力太大。试试呗……

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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众人皆醉，惟我独醒，就此沉沦，人称睡神。
3楼2015-07-17 21:37:36
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yuzhihao11

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by klicking at 2015-07-17 07:59:48
C18色谱柱的话，可考虑水中加入三氟乙酸、醋酸铵等或缓冲盐，有机相还是建议用乙腈

继续求问大侠，在我的色谱图上，有一个污染物的峰，用水+乙腈洗不去，即使换到10%水+90%异丙醇也洗不去，请问还有什么方法值得试一下？
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4楼2015-07-18 00:44:11
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