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0905zytx

新虫 (初入文坛)

[求助] 高效液相色谱管路堵塞压力超过上限 已有7人参与

最近在用磷酸盐缓冲液测定5’-nucleotides时遇到了一个问题,希望大家能帮忙解决一下:
第一天,测定结束后(峰形正常,压力稳定),用20%甲醇溶液清洗2h, 流速0.5ml/min,之后用100%甲醇清洗灌柱30min,1ml/min (压力稳定)。
第二天测定前用20%甲醇过渡,在洗了几分钟后压力开始上升并超过上限3000psi。
purge阀打开,流动相冲洗,压力为40psi;purge阀关闭,20%甲醇,流速0.1ml/min在五分钟内压力一直上升最后超过上限。且色谱柱入口没有溶液流出。
请问这是什么原因,应该怎么解决?拜托。
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顺顺儿

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一步步排除吧,你把管路从后到前一步步拆开,查看系统压力,查看到底是哪部分压力过大,然后再有针对的分析,还有你看一下你的管路,别有严重折叠的,这个一般不会出现,不过最好也看一下,如果确定是泵头还有混合器部分,那可能是盐析导致,你看看仪器上有没有专门洗泵头的,用纯化水洗几遍,还有你把柱子换成两通,系统用稍微热点的水冲洗一段时间,把析出的盐溶解洗掉,先这么一点点排查吧,如果还不好,就肯定是仪器的某些问题了
9楼2015-07-17 09:51:49
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苯环+OH_装醇

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
0905zytx: 金币+5, 有帮助 2015-07-16 16:29:16
可能盐析出了,单泵的话我想主要问题在柱塞杆的位置。二元泵的话,水相和有机相是两个管路,盐析的主要位置就在混合器的地方,目前使用的是二元泵,盐浓度很大的时候会在混合器的位置堵塞,经常拆开来超声的。非专业的,经验猜想,希望有帮助。
2楼2015-07-16 16:25:11
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0905zytx

新虫 (初入文坛)

混合器的话是在哪个位置呢?有没有其他的名字
3楼2015-07-16 16:32:39
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苯环+OH_装醇

版主 (知名作家)

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【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 0905zytx at 2015-07-16 16:32:39
混合器的话是在哪个位置呢?有没有其他的名字

我用的是岛津20AT的,混合器就在泵的侧边,一个方形的盒子,你可以看一下流动相的管路,很好找的
4楼2015-07-16 16:35:57
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