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谷人人

新虫 (初入文坛)

[交流] pcr产物跑不出孔是怎么回事？ 已有6人参与

有没有大神能够解答一下，PCR产物跑不出凝胶孔是怎么回事？

如附件中图，marker能够跑下来，孔中有亮带但是跑不下来，这是怎么回事？

求解答。

pcr产物跑不出孔是怎么回事？
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1楼 2015-07-16 16:08:58
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我是鱼豆腐

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
一般样孔里有亮的条带说明有杂质，也就是蛋白质太多，你提取的dna可能纯度不够；再就是你的电泳条件可能不合适，比如电压不够，我一般用110V的，25min，，换电泳液，点样的时候不会戳破了胶了吧- -
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2楼2015-07-16 16:51:09
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sk1981521

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可能是蛋白质污染
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3楼2015-07-16 21:36:12
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BBMC-2012

木虫 (知名作家)
蛋白质，是不是没加dntp
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4楼2015-07-17 09:35:18
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谷人人

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 我是鱼豆腐 at 2015-07-16 16:51:09
一般样孔里有亮的条带说明有杂质，也就是蛋白质太多，你提取的dna可能纯度不够；再就是你的电泳条件可能不合适，比如电压不够，我一般用110V的，25min，，换电泳液，点样的时候不会戳破了胶了吧- -

我这电泳用的是120伏，marker能跑下来说明这电泳应该没问题吧。
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5楼2015-07-18 09:53:08
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谷人人

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by BBMC-2012 at 2015-07-17 09:35:18
蛋白质，是不是没加dntp

dntp应该是加了的，你看第5五泳道还是有点东西的
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6楼2015-07-18 09:55:03
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jiushiweiyu

银虫 (初入文坛)
★
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这种情况可能PCR并没有产物，你可以先跑个全基因组的胶试试，如果全基因组有条带，就需要看看是否是PCR条件不合适，包括PCR所需的酶、引物等等是否有问题。
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7楼2015-07-18 09:55:26
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谷人人

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by sk1981521 at 2015-07-16 21:36:12
可能是蛋白质污染

有可能
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8楼2015-07-18 09:56:34
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匿名

用户注销 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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9楼2015-07-19 07:21:50
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199006287956

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
堵胶孔了，重做一块胶，尽量多溶解一会，胶槽和梳子用前清洗一下，之前遇到这个问题，基本都是这样解决的。

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追求不惜，奋斗不息
10楼2015-07-19 08:28:13
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