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谷人人

新虫 (初入文坛)

[交流] pcr产物跑不出孔是怎么回事? 已有6人参与

有没有大神能够解答一下,PCR产物跑不出凝胶孔是怎么回事?

如附件中图,marker能够跑下来,孔中有亮带但是跑不下来,这是怎么回事?

求解答。

pcr产物跑不出孔是怎么回事?
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我是鱼豆腐

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
一般样孔里有亮的条带说明有杂质,也就是蛋白质太多,你提取的dna可能纯度不够;再就是你的电泳条件可能不合适,比如电压不够,我一般用110V的,25min,,换电泳液,点样的时候不会戳破了胶了吧- -
2楼2015-07-16 16:51:09
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sk1981521

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可能是蛋白质污染
3楼2015-07-16 21:36:12
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BBMC-2012

木虫 (知名作家)


蛋白质,是不是没加dntp
4楼2015-07-17 09:35:18
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谷人人

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 我是鱼豆腐 at 2015-07-16 16:51:09
一般样孔里有亮的条带说明有杂质,也就是蛋白质太多,你提取的dna可能纯度不够;再就是你的电泳条件可能不合适,比如电压不够,我一般用110V的,25min,,换电泳液,点样的时候不会戳破了胶了吧- -

我这电泳用的是120伏,marker能跑下来说明这电泳应该没问题吧。
5楼2015-07-18 09:53:08
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谷人人

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by BBMC-2012 at 2015-07-17 09:35:18
蛋白质,是不是没加dntp

dntp应该是加了的,你看第5五泳道还是有点东西的
6楼2015-07-18 09:55:03
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jiushiweiyu

银虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这种情况可能PCR并没有产物,你可以先跑个全基因组的胶试试,如果全基因组有条带,就需要看看是否是PCR条件不合适,包括PCR所需的酶、引物等等是否有问题。
7楼2015-07-18 09:55:26
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谷人人

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by sk1981521 at 2015-07-16 21:36:12
可能是蛋白质污染

有可能
8楼2015-07-18 09:56:34
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匿名

用户注销 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖仅楼主可见
9楼2015-07-19 07:21:50
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199006287956

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
堵胶孔了,重做一块胶,尽量多溶解一会,胶槽和梳子用前清洗一下,之前遇到这个问题,基本都是这样解决的。

[ 发自小木虫客户端 ]
追求不惜,奋斗不息
10楼2015-07-19 08:28:13
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