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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 微生物、发酵 » 扇贝蛋白酶解DPPH吸光度值测定
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daid01

金虫 (小有名气)

[求助] 扇贝蛋白酶解DPPH吸光度值测定 已有3人参与

我最近在做扇贝蛋白酶解制备抗氧化肽。
在酶解过程中，需要每小时测定DPPH自由基清除率（利用分光光度计），但是实际测定时，吸光度值都是2.892之类的数值，据说是因为光透不过去，才测不出来~~
不知道是不是这个原因啊
如果真的是因为这个，我如果测定之前过滤一下会不会好一些？但是如果过滤的话会不会对实验结果有影响？
望各位大神给予回复 谢谢
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1楼 2015-07-16 15:48:48
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是水货

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
daid01(sytucom代发): 金币+1, 感谢应助，希望继续关注楼主回复，谢谢 2015-09-08 22:15:06
吸光值真大，浓度是多少？是不是浓度太大造成的。是否认真参考文献呢？
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4楼2015-07-16 19:25:43
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sytucom

版主 (知名作家)

日光之下，并无新事

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议：降低DPPH的浓度，这是DPPH浓度过高引起的。并不是没有提取干净。
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已有的事，后必再有，已行的事，后必再行。
2楼2015-07-16 16:27:16
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
daid01(sytucom代发): 金币+1, 感谢应助，希望继续关注楼主回复，谢谢 2015-09-08 22:15:00
可能是蛋白本身溶解性不好，酶解了之后也没有能够完全溶解，所以才会有“光透不过去”的情况发生。
如果过滤或者离心，那么你测定的就是扇贝蛋白/酶解产物的水溶性部分的DPPH清除活性，这样一来，你的样品的浓度又没法确定了。
建议不要做DPPH清除，完全没有意义。
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3楼2015-07-16 16:32:16
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daid01

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by sytucom at 2015-07-16 16:27:16
建议：降低DPPH的浓度，这是DPPH浓度过高引起的。并不是没有提取干净。

不是啊 我是参考别人的文献做的，就是2mmol/l，应该不高吧
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5楼2015-07-18 20:13:27
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