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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 精细化工 » 染料 » 荧光染料/荧光探针荧光强度问题
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ylaxfyy

木虫 (小有名气)

[求助] 荧光染料/荧光探针荧光强度问题 已有3人参与

请问各位大神，有谁合成过某些荧光染料，在体外测试时候荧光很弱，但是在细胞内测试时荧光特别强（共聚焦的激光开的很弱，大概2%），我想知道这是什么原因！这个染料有个碳碳双键的桥连，两边的基团可以自由旋转，他的温敏和黏度性质我都测试过，它随着温度的升高荧光减弱，随着溶剂粘度的增加，荧光增强，但是只是增强了大约5倍。是不是这个染料和某些特殊的蛋白作用了，导致了碳碳双键不能自由旋转而荧光增强？还有您觉得这个荧光染料性能好不好？
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1楼 2015-07-16 10:15:04
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ylaxfyy

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by happiness2632 at 2015-08-11 08:51:00
粘度，极性等都可能影响荧光强度 。特别双键的桥链在细胞里可能就变成刚性得了 。另外，细胞内的荧光强度和溶液里的不能类比 。

这些我都测试了，在体外测试的，都没有影响。我们做过其他类似的荧光探针，没有像这个这么奇怪的。其他的探针如果黏度或者极性有影响的话，体内和体外是类似的，要么荧光都强要么都弱。只有这个很奇特，体外荧光弱，体内荧光特别强，我们猜测可能是和细胞内的某些酶作用了，或者一些蛋白作用了，进入到蛋白的某些通道导致了荧光增强。但是我们是做化学的，生物方面不懂，所以想了解一下！谢谢！
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7楼2015-08-11 20:27:10
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上善若水0224

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
2楼2015-07-29 10:47:15
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ylaxfyy

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 上善若水0224 at 2015-07-29 10:47:15
前辈，我不太清楚你说的具体原因。另一事相询，荧光探针染色后杀死细胞还能用激光共聚焦观察到荧光么？因为做的是叶片组织，要观察截面和亚显微结构的时候必须得固定后杀死细胞。非常感谢

不好意思啊，没做过植物细胞。我们都是做的动物细胞（正常的细胞和癌细胞），如果在细胞被杀死之前细胞将荧光染料或者荧光探针吞进细胞内的话，共聚焦是能看到荧光的。
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3楼2015-07-29 20:54:14
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nickeyluan

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
udarling: 金币+1, 鼓励交流，欢迎再来！ 2015-08-11 11:21:46
ylaxfyy: 金币+1, ★有帮助 2015-08-11 20:20:49
会不会是PH的影响？ 因为某些染料在极端的PH下，荧光效果会变弱
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走马观花花已落，戎马倥偬又年年！
4楼2015-08-05 10:44:56
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