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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 关于western blot转膜，请教大神
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫
★
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引用回帖:
8楼: Originally posted by 凌波丽 at 2015-07-16 13:42:41
WB出现非特异性条带的原因与解决方法

凌波丽

2015年7月16日

1.抗体浓度过高；降低一抗、二抗的浓度，可以分梯度进行。

2.一抗的特异性不足；使用单克隆抗体，单克隆位点的抗原表位是唯一的，多克隆位点 ...

她这实验蛋白还在胶上，就没有转到膜上，不需要考虑特异不特异，那是接下来曝光后看到结果才需要分析的问题。。。。
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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
11楼2015-07-17 11:12:08
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8wangle
12楼2015-07-17 11:36:26
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stl409
13楼2015-07-17 12:10:25
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star97lx

新虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-07-17 11:12:08
她这实验蛋白还在胶上，就没有转到膜上，不需要考虑特异不特异，那是接下来曝光后看到结果才需要分析的问题。。。。...

对对，而且是小分子的蛋白胶上还有，可能是剩下的部分，也可能是全部
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14楼2015-07-18 08:58:15
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1510050322

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
曝光不出结果的话，你就应该从转膜之后的孵育、一抗、二抗及曝光液上寻找原因。我之前做毕设的时候也是这种问题，后来逐一排除才得出结果的。
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15楼2015-07-30 18:51:30
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huiting410

金虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
18761615793这个金虫已经分析的很到位了，怎么才给0.5
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16楼2015-07-31 05:45:10
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ghqiu09

禁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
17楼2015-08-09 23:56:33
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star97lx

新虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by ghqiu09 at 2015-08-09 23:56:33
碰到这种情况，我很想问你，你的胶对么？Tris-HCl的buffer PH没搞错吧

胶是按照说明书配的，直接买的配胶的试剂盒
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18楼2015-08-10 10:11:26
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syhzlsd

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以适当增加转膜时间
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19楼2015-08-18 17:31:48
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