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随风追梦

木虫 (正式写手)

[求助] 关于荧光定量的异常求助万能的小木虫及虫友

荧光定量出现异常,下面是两组重复,条件什么的都一样,加样用的排枪,基本排除加样原因,但是熔解曲线出现下图1的异常,绿色和蓝色为不同模板,图1图2 绿色的对应,其他引物也是这一组模板有问题,想请问这是什么原因,怎么解决……?急求,跪谢……

关于荧光定量的异常求助万能的小木虫及虫友
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关于荧光定量的异常求助万能的小木虫及虫友-1
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初心不改!
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满谛

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 随风追梦 at 2015-07-15 11:37:12
蓝色和绿色是同一个引物,只不过模板不一样,其他的都一样……这是模板出了什么问题呀,怎么解决?...

溶解曲线有多个峰显示有特异性产物,这个引物不适合绿色的那个的模版
listen to the voice in flower.
5楼2015-07-15 12:48:47
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满谛

木虫 (正式写手)

可能是引物特异性不强,或者是退火温度不佳。 蓝色是内参,绿色是引物?

[ 发自小木虫客户端 ]
listen to the voice in flower.
3楼2015-07-15 00:22:55
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随风追梦

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 满谛 at 2015-07-15 00:22:55
可能是引物特异性不强,或者是退火温度不佳。 蓝色是内参,绿色是引物?

蓝色和绿色是同一个引物,只不过模板不一样,其他的都一样……这是模板出了什么问题呀,怎么解决?
初心不改!
4楼2015-07-15 11:37:12
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随风追梦

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 满谛 at 2015-07-15 12:48:47
溶解曲线有多个峰显示有特异性产物,这个引物不适合绿色的那个的模版...

模板是相同材料在不同处理后的差异……是模板的问题,不过个人感觉不是说像你说的这样,引物不适合模板的情况……
初心不改!
6楼2015-07-15 19:57:16
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