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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 关于荧光定量的异常求助万能的小木虫及虫友
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随风追梦

木虫 (正式写手)

[求助] 关于荧光定量的异常求助万能的小木虫及虫友

荧光定量出现异常，下面是两组重复，条件什么的都一样，加样用的排枪，基本排除加样原因，但是熔解曲线出现下图1的异常，绿色和蓝色为不同模板，图1图2 绿色的对应，其他引物也是这一组模板有问题，想请问这是什么原因，怎么解决……？急求，跪谢……

关于荧光定量的异常求助万能的小木虫及虫友
1.png


关于荧光定量的异常求助万能的小木虫及虫友-1
2.png
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初心不改！
1楼 2015-07-14 18:17:16
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随风追梦

木虫 (正式写手)
为什么没人回？
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初心不改！
2楼2015-07-14 22:32:51
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满谛

木虫 (正式写手)
可能是引物特异性不强，或者是退火温度不佳。 蓝色是内参，绿色是引物？

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listen to the voice in flower.
3楼2015-07-15 00:22:55
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随风追梦

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 满谛 at 2015-07-15 00:22:55
可能是引物特异性不强，或者是退火温度不佳。 蓝色是内参，绿色是引物？

蓝色和绿色是同一个引物，只不过模板不一样，其他的都一样……这是模板出了什么问题呀，怎么解决？
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初心不改！
4楼2015-07-15 11:37:12
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满谛

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 随风追梦 at 2015-07-15 11:37:12
蓝色和绿色是同一个引物，只不过模板不一样，其他的都一样……这是模板出了什么问题呀，怎么解决？...

溶解曲线有多个峰显示有特异性产物,这个引物不适合绿色的那个的模版
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5楼2015-07-15 12:48:47
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随风追梦

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 满谛 at 2015-07-15 12:48:47
溶解曲线有多个峰显示有特异性产物,这个引物不适合绿色的那个的模版...

模板是相同材料在不同处理后的差异……是模板的问题，不过个人感觉不是说像你说的这样，引物不适合模板的情况……
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初心不改！
6楼2015-07-15 19:57:16
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