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luzr924

新虫 (初入文坛)

[交流] 大家看看这样的培养基怎么优化?

我现在做的是发酵产酶。这种酶是一种诱导酶。出发培养基是这样的:菊糖 1%,硝酸钠0.2%,酵母膏0.02%,硫酸镁0.05%,氯化钾0.05%,磷酸二氢钾0.05%,七水硫酸亚铁0.001%,PH7.0.
以前都是用的高纯度菊糖,后来做了一点碳源选择,发现粗制菊糖比高纯度菊糖好很多。但是粗制菊糖的质量不好控制,我担心以后做培养基优化会有点麻烦。已知镁离子,亚铁离子有助于产酶,其他金属离子对产酶的影响还没有做过。同时有多个金属离子的出发培养基怎么优化还不清楚。氮源选择还没开始做,想做个复合氮源,但是我做摇瓶的发酵时间比较长,有3天,是不是还要考虑氮源是生理酸性盐或碱性盐?需要控制PH吗?怎么控制?还有以后的因素水平怎么处理?
大家说说该怎么做啊?用哪种方法优化培养基比较好啊?
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pph0259

木虫 (正式写手)

★
reasonspare(金币+1,VIP+0):thx
你的问题太多,无法一一回答。
建议先做最简单的正交实验!!
2楼2008-08-05 23:14:53
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su1154957

银虫 (小有名气)

优化培养基一般都是碳氮源,无机盐及金属离子,有些需要做微量元素。
一般来说,碳氮源先做单一因子试验。确定好以后,可以做一个正交实验。
再做多个金属离子的优化,推荐用placket burman实验设计,这个设计的资料很多网站上都有,目前也有很多人在做
3楼2008-08-06 19:07:07
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su1154957

银虫 (小有名气)

这些都要慢慢摸索,祝你成功

[ Last edited by su1154957 on 2008-8-6 at 19:10 ]
4楼2008-08-06 19:08:35
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shinevip

木虫 (正式写手)

均匀设计
5楼2008-08-07 08:40:42
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qijilaji

金虫 (小有名气)

碳源、氮源、微量元素、pH和培养时间都要先做单因素,了解了最佳参数范围和变化趋势,培养基的种类和浓度都是先在单因素实验中确定,然后再根据你的因素水平数做正交或者均匀设计,5因素4水平以下的都建议不要采用均匀设计,实验量虽然比正交小点,但是在最后数据分析的时候拿到的结论会少很多,搞不好又要补充实验,更麻烦。你现在想那么多没用,想到一个可能的影响因素就赶紧上单因素实验,拿到数据才是真的。
6楼2008-08-07 09:20:10
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