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dengfeiwolf

铁杆木虫 (著名写手)

生亦何欢,死亦何苦?

[交流] 请教一个HPLC问题

首先说明我是做有机合成的,并非专业分析人士.
现在我在做一个哌嗪二酮(DKP)的化合物,没有查到具体的分析方法,只好参考同类物的方法去做.分析之前用UV扫描了一下,在200-210吸收.分析人员多次调整了方法,最后打出来的结果还是感觉不太好,总共走了40min,走到20min以后基线就开始上浮,很多峰都连在一起.主产物在3.5min出峰的.
我知道这样可以也没说清楚,因为事实上我不清楚的事太多,呵呵
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永远别恨你的敌人,那会影响你的判断力
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zcpzm

银虫 (正式写手)

来学习,帮楼主先顶一下
2楼2008-08-04 13:15:40
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wei_wei_1983

木虫 (著名写手)

走梯度呗,分离状况会改善 。
我们的药学讨论空间http://kitbar.kilu.de/bbs/?fromuid=4 讨论群70414423
3楼2008-08-04 16:22:12
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chenfengpolang

金虫 (著名写手)

1 在210后有无最大吸收,最好用后面的
2 3.5min是对照品还是溶剂或杂质?
3 主成分保留时间到底多少?
4 基线上浮是每次如此还是这次?
主要是要知道主成分保留时间, 根据这调有机相比例
乘风破浪,生生不息,衔一枝橄榄,为你带来永远的春天,和你慢慢地变老,幸哉,乐哉!
4楼2008-08-04 16:55:11
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j115090587

金虫 (正式写手)

这么早就出峰了?
5楼2008-08-04 19:21:23
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lankywang

金虫 (著名写手)

如果主产物这么早就出峰,那后面干吗还要跑这么久啊?
6楼2008-08-04 20:26:57
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dengfeiwolf

铁杆木虫 (著名写手)

生亦何欢,死亦何苦?

非常谢谢这么多虫友的关心!

真的不好意思,今天又加班到现在了,晚上回来看见这么多虫友的热帖,很温馨!

[ Last edited by dengfeiwolf on 2008-8-4 at 21:48 ]
永远别恨你的敌人,那会影响你的判断力
7楼2008-08-04 21:43:26
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dengfeiwolf

铁杆木虫 (著名写手)

生亦何欢,死亦何苦?

我逐个回答各位虫友的问题:
wei_wei_1983 :走梯度呗,分离状况会改善 。
真的很抱歉,我不是很清楚梯度的具体技术问题。我会和分析中心的人沟通,看是否有效果。我也会稍后去学习一下,有问题再向你请教。谢谢!
永远别恨你的敌人,那会影响你的判断力
8楼2008-08-04 21:52:12
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dengfeiwolf

铁杆木虫 (著名写手)

生亦何欢,死亦何苦?

chenfengpolang:
1 在210后有无最大吸收,最好用后面的
2 3.5min是对照品还是溶剂或杂质?
3 主成分保留时间到底多少?
4 基线上浮是每次如此还是这次?
主要是要知道主成分保留时间, 根据这调有机相比例

非常谢谢,你的回答非常详细。
1.从UV扫描的结果看,最大吸收在200-210,另外在250左右有一个比较弱的吸收。
2.我现在手里没有对照品,所以也不知道这个东西是不是杂质。我给分析人员的流动相是:10mmol/L磷酸二氢钾(用1%磷酸调节pH至3.5)/乙腈=89/11
3.我说过了,主成分(69%,面积归一法)的保留时间是3.5min
4.目前我还只做了一个样品送检,他们尝试了很多次才打出这个结果来,基本上都是会上浮的。
期待你的指点!谢谢!
永远别恨你的敌人,那会影响你的判断力
9楼2008-08-04 22:02:44
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dengfeiwolf

铁杆木虫 (著名写手)

生亦何欢,死亦何苦?

lankywang :如果主产物这么早就出峰,那后面干吗还要跑这么久啊?

虫友你的话好像不妥。我的产品去做色谱是要将混合物中的各物质分开,而不是利用色谱分离提纯物质,所以我个人认为只要是色谱能出峰被检测的,都应该继续走完为止。而且色谱柱中是不应该残留物质的,否则下一次基线也还是很难快速走平。而且现在只是我主观意愿认为这个主产物是目标产物,而事实上也很可能这是个杂质。
谢谢你的关注!
永远别恨你的敌人,那会影响你的判断力
10楼2008-08-04 22:09:23
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