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小小小亭子

新虫 (小有名气)

[求助] 原核表达 已有1人参与

以前做过一个蛋白,上清表达,表达量中等;后来又断断续续做过两次,上清表达量降低了许多,重新转化也是这样;最近再拿出来做时,上清不表达了,包涵体还是有表达,重新转化也是这样,这是怎么回事?求助!
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小小小亭子

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wufeng1991 at 2015-07-03 12:29:14
你说的重新转化是用新提的质粒,还是最原始的质粒?

原始的质粒
4楼2015-07-06 10:05:04
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查看全部 4 个回答

恶魔的左眼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我一直觉得,蛋白这个玩意,尤其是这种上清蛋白,对于表达条件的要求很高,经常性的以前的可溶性表达蛋白变成了包涵体,我们的应对方法一是重新摸索表达条件,二是直接复性(这个主要是根据目的蛋白的下游应用决定)
早上一副睡不醒的样子,下午一副没睡醒的样子,晚上一副打了鸡血的样子!
2楼2015-07-03 11:06:15
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wufeng1991

新虫 (小有名气)

你说的重新转化是用新提的质粒,还是最原始的质粒?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2015-07-03 12:29:14
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