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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 原核表达
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小小小亭子

新虫 (小有名气)

[求助] 原核表达 已有1人参与

以前做过一个蛋白，上清表达，表达量中等；后来又断断续续做过两次，上清表达量降低了许多，重新转化也是这样；最近再拿出来做时，上清不表达了，包涵体还是有表达，重新转化也是这样，这是怎么回事？求助！
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1楼 2015-07-03 09:50:27
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小小小亭子

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wufeng1991 at 2015-07-03 12:29:14
你说的重新转化是用新提的质粒，还是最原始的质粒？

原始的质粒
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4楼2015-07-06 10:05:04
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恶魔的左眼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我一直觉得，蛋白这个玩意，尤其是这种上清蛋白，对于表达条件的要求很高，经常性的以前的可溶性表达蛋白变成了包涵体，我们的应对方法一是重新摸索表达条件，二是直接复性（这个主要是根据目的蛋白的下游应用决定）
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早上一副睡不醒的样子，下午一副没睡醒的样子，晚上一副打了鸡血的样子！
2楼2015-07-03 11:06:15
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wufeng1991

新虫 (小有名气)
你说的重新转化是用新提的质粒，还是最原始的质粒？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2015-07-03 12:29:14
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