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烨火赤心

铜虫 (小有名气)

[求助] PCR-sscp 已有2人参与

各位大家好小弟跑非变性聚丙烯酰胺凝胶好多次了,可银染的DNA条带却一直很暗,是怎么回事?虽然PCR产物经琼脂糖凝胶电泳检测是可以的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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freud1981213

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
没有图片,你的银染方法是否有问题?再有应该是区分核酸多态性的,关键是区分出多个条带,能够达到该方法目的就行了。
agoodstartingpoint
2楼2015-07-02 22:01:00
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烨火赤心

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by freud1981213 at 2015-07-02 22:01:00
没有图片,你的银染方法是否有问题?再有应该是区分核酸多态性的,关键是区分出多个条带,能够达到该方法目的就行了。

额,我的染色方法是固定液里固定6-15分钟,然后水冲洗3次后染色15分钟-20分钟,然后再冲洗3次,加显色液,显色5-15分钟。
固定液配方:50ml乙醇,2.5ml冰乙酸,定容到500ml
染色液配方:50ml乙醇,2.5ml冰乙酸,1g硝酸银,定容到500ml
显影液配方:15gNaOH,2.5ml甲醛,定容到500ml。
这里有什么问题么?

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  • 2015-07-03 09:29:41, 1.06 M
3楼2015-07-03 09:35:00
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plmpl

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

是不是显影液 等 配的时候有问题
心静如水
4楼2015-12-20 18:52:15
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