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含拟南芥基因构建的GFP载体农杆菌打烟草后无荧光，会是什么原因
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我最近构建了一个载体，是拟南芥一个基因自身启动子+该基因CDs+GFP，将这个质粒转入农杆菌C58后，打入烟草叶片下表皮，在荧光显微镜下观察，却没有荧光出现。想问一下，这可能是什么原因造成的。 补充信息：1、在将农杆菌打入烟草前，我鉴定过单菌落，用该基因CDs的引物能够扩出相应的片段； 2、我还有另外一个载体，是35S启动子+该基因CDs+GFP，同样打烟草后是可以看到荧光的，而我在构建自身启动子的载体时，是将35S启动子切下来，换成自身自动自，CDs+GFP那一段我都没有动过。 3、构建的自身启动子+该基因CDs+GFP的这个质粒，构建好后，我选用了几个酶切位点，鉴定构建是否正确，当时的酶切后的电泳图显示酶切后的条带是正确的。 |
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2楼2016-06-26 19:38:35