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arrisa

金虫 (小有名气)

[求助] 请大侠看看转染是否成功 已有1人参与

本人瞬时转染胃癌细胞AGS,用的是Life的RNAi MAx转染试剂,使用control siRNA(Fluorescein conjugate)确定转染效率。
操作步骤按说明书进行。
结果:细胞内有个很强的荧光点,对照(不加转染试剂)则无荧光点。
我看大家做的转染,细胞会有均匀荧光,但我做了好多次,都是这样的结果。
另用siRNA做了试验,收集细胞做WB发现相应的蛋白表达有变化。
我是化学出生,不太懂这个,请大侠帮忙看看。

请大侠看看转染是否成功
2015-05-21-21-15-05-05972_2048-1536.png
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董博士

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-10 21:11:44
你这多大倍数的?看着应该是没转染成功,只是一些细胞碎片或其他的分子,转染成功的细胞可以清晰的看到细胞形状的
医学&统计学
2楼2015-07-02 16:13:36
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arrisa

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 董博士 at 2015-07-02 16:13:36
你这多大倍数的?看着应该是没转染成功,只是一些细胞碎片或其他的分子,转染成功的细胞可以清晰的看到细胞形状的

可能是200倍拍的。
细胞内只有个强的荧光点,所以看不清细胞轮廓。明场可以看到。
3楼2015-07-10 14:29:10
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xiaomili1206

新虫 (初入文坛)

转染好多次都这样?还是换个转染试剂试试吧,现在也有RNA转染专用试剂,比如EntransterTM -R4000,还不错,价格也便宜。http://www.engreen.cn/
4楼2015-08-21 15:04:17
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