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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » ［急！！］大肠杆菌基因工程菌不加诱导剂蛋白也表达
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su1154957

银虫 (小有名气)

[交流] ［急！！］大肠杆菌基因工程菌不加诱导剂蛋白也表达

我用的是BL21(DE3)，质粒pet30a，以前用的是LB做对照，没有问题。但是现在用TB培养基做对照，没有加任何诱导剂，表达量很高，不知道怎么回事，TB培养基配方也很简单，就蛋白胨、酵母、甘油、磷酸盐。
我现在怀疑是之前实验室的人构建这个工程菌的时候出了问题，不知道有没有这个可能：工程菌构建好之后，在LB培养基里做了诱导与不诱导的实验，但是没有用别的培养基试一试。而LB培养基因为营养物质有限的缘故，表达量很低，几乎与没有诱导无差别，就把它当作没有表达了。
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1楼 2008-07-31 10:30:45
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xyfu

金虫 (小有名气)
su1154957，已经发到你信箱。请注意查收。
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5楼2008-08-01 01:48:12
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superwheat

银虫 (正式写手)
两次实验中间有没有换过培养基的品牌或者批次？
有一个可能性是蛋白胨里面也许会多少含有些乳糖，也许新的蛋白胨里面含的乳糖比较多，乳糖也有和IPTG一样的诱导作用。
当然，也有可能你的什么东西被IPTG污染咯。
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2楼2008-07-31 15:01:34
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xyfu

金虫 (小有名气)
可能是高浓度的酵母粉在起作用。可以参考一下我的文章：

Effect of yeast extract on the expression of thioredoxin-human parathyroid hormone from recombinant Escherichia coli. Journal of Chemical Technology and Biotechnology, 2006, 81(12): 1866-1871.
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3楼2008-07-31 16:19:10
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su1154957

银虫 (小有名气)
xyfu能发给我全文吗？
zhshq25@163.com
刚在网上搜了一下，没搜到全文
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4楼2008-07-31 20:57:20
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