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通过PCR检测嵌合体的嵌合率,我这种方法可行吗?
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| 以雄性小鼠为对照组,嵌合体小鼠为实验组,分别检测内参基因β-actin和SRY基因的Ct值。△Ct雄=CtSRY-Ct内参,△Ct嵌=CtSRY-Ct内参,然后用△Ct嵌-△Ct雄=△△Ct,而嵌合体和雄性外周血单核细胞中SRY基因的表达量差别为2-ΔΔCt,即嵌合体中SRY的含量为雄性中的2-ΔΔCt倍。因为每个雄性外周血单核细胞中含1拷贝的内参基因和1拷贝的SRY,而嵌合体外周血单核细胞中含1拷贝的内参基因和1拷贝的SRY或X染色体(不含SRY),嵌合率=含SRY的细胞数目/总的细胞数目,也等于SRY的拷贝数/内参基因的拷贝数,雄性的嵌合率=100%,故嵌合体的嵌合率为2-ΔΔCt ×100%,请各位前辈指导一下!谢谢!! |
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