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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 用设计的小鼠引物去拉杂交瘤细胞抗体序列尽然出现人源序列
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same0985

铜虫 (小有名气)

[求助] 用设计的小鼠引物去拉杂交瘤细胞抗体序列尽然出现人源序列 已有1人参与

如题。确定不是模板污染
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1楼 2015-06-26 10:39:52
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匿名

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★ ★ ★ ★ ★
same0985: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2015-07-04 12:38:22
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2楼2015-06-30 11:31:14
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same0985

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by louis_cheung at 2015-06-30 11:31:14
鼠抗的部分GERMLINE 序列（可变区）很像人抗的部分GERMLINE 序列（可变区），如果只是可变区像的话很正常，如果是恒定区像的话就有点~~

就是在可变区出现这种状况，blast结果处理跟人同源性高于鼠，然后就怀疑样品被污染了，或引物有问题，应该怎么避免呢？谢谢
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3楼2015-07-03 09:51:15
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匿名

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4楼2015-07-03 16:16:10
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same0985

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by louis_cheung at 2015-07-03 16:16:10
你的杂交瘤是鼠-鼠杂交吗？
抗体的重轻链序列都很像人的么？
如果该杂交瘤细胞表达的抗体就是这个序列的话，就没有什么了~~
如果条件允许的话，表达一点该抗体，包被抗原，做个ELISA检测一下就知道该序列是不是 ...

1.是鼠－鼠杂交
2.只有重链像人，轻链没问题
3.抗体序列没法确定是不是就是需要的，要经过一系列筛选
4.这个方法可以试一下
5.你觉得是细胞污染的可能性大还是我后期逆转录pcr污染概率大呢

非常感谢您的回复！
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5楼2015-07-04 12:38:06
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匿名

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6楼2015-07-05 19:09:59
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