24小时热门版块排行榜    

查看: 2394  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

uuu555000

捐助贵宾 (正式写手)

[求助] 急!急!农杆菌AGL1转化遇到问题,做过农杆菌转化的进已有2人参与

做农杆菌AGL1(买的感受态),做转化,
加质粒,冰浴,液氮速冻5min,在37摄氏度水浴 5min,再冰浴5min,
加无抗生素的 LB 200 r/min孵育2-4h,
最后离心,留100微升悬液涂布于50微克每毫升的含利福平的LB平板。
28摄氏度培养,
说明书是培养2-3d,可是培养24h,就已经长出一片了,无单菌落啊,
这是怎么回事啊?是因为菌体浓度太高吗?
后来再做一次,操作与上述一样,最后过夜培养12h,AGL1在LB平板(含利福平)还是长成一片。
求经验的人指导啊
回复此楼
无所谓好或不好,人生一场虚空大梦,韶华白首,不过转瞬,惟有天道恒在,往复循环,不曾更改
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

winslow-浮萍

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 花间鹿666 at 2016-01-26 11:07:53
请问你的问题找到原因了吗?我最近叶遇到这个问题,农杆菌涂在含氨苄和利福平的板子上,第二天就长满菌,看不到单菌落,各种原因都排查,没找到原因

我最近转化农杆菌,也是第二天就长满菌,请问你这个问题解决了么? 是什么原因呀
fighting力求快乐地做科研
12楼2016-10-22 14:45:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
uuu555000: 金币+2 2015-06-23 13:46:43
载体什么抗性,只加利福平肯定长成一片

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-06-22 21:33:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

orangeleaf

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
uuu555000: 金币+1 2015-06-23 13:46:37
1.加抗性,同楼上;2.看看染菌没。另外,问下,感受态的农杆菌AGL1哪儿买的?
工业酶-T180;AU-400FLD;B85vanguard;E3-1280v3;NH-D9L;8GBx2;R7-250A-ZLH4;Black500GB;EA191M;SK-8115;M111s
3楼2015-06-23 09:22:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

uuu555000

捐助贵宾 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by orangeleaf at 2015-06-23 09:22:57
1.加抗性,同楼上;2.看看染菌没。另外,问下,感受态的农杆菌AGL1哪儿买的?

博迈德
无所谓好或不好,人生一场虚空大梦,韶华白首,不过转瞬,惟有天道恒在,往复循环,不曾更改
4楼2015-06-23 13:37:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见