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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

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6楼: Originally posted by siriusxuan at 2015-06-23 14:28:59
Loading buffer 一般10*的都带EDTA或者SDS这种就不能再用了,只能跑胶回收片段来做。6*的和MIX里面的loading buffer不含这两种成分,所以可以直接做,但最好还是建议胶回收之后再做。


有这么一说??

正经配的或者买的loading buffer都有EDTA,SDS有没有不见得。

再说,为什么要胶回收?最简单的酚抽醇沉一下就完事,或者直接过一个PCR回收柱子。

其实,一点点EDTA没有太大影响,特别是模板给很少的时候。
11楼2015-06-25 10:04:12
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 键盘上的脚丫 at 2015-06-23 22:22:41
是溴酚蓝,但是里面不是也有甘油吗? 会终止反应的。...



Taq酶里还有50%的甘油呢?
12楼2015-06-25 10:06:26
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bright8

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

可以割胶回收纯化一下,再做2次PCR啦。
13楼2015-06-25 21:28:54
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Huobol

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

肯定能行,买的Mix里不就带有Loading Buffer吗。我做RACE用的也是Mix,二轮PCR时就把一轮产物稀释100或200倍做模板,完全没问题,照样P出亮带,测序也是对的。
让羽毛再飞一会儿
14楼2015-09-10 17:36:29
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