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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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fengzhiyong

铜虫 (初入文坛)

[交流] 质粒小提怎么出了两条带

我用实验室转化了的冻存菌做小提,结果检验的时候跑出两条带,于是切胶回收了目的条带,但再跑电泳又出现了大的条带。请教达人大条带是什么?怎么产生的?如何避免或去除?

[ Last edited by 350784478 on 2009-7-16 at 20:29 ]
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biogefart

木虫 (著名写手)

酶切后电泳!


fengzhiyong(金币+1,VIP+0):谢谢
如果不是做构象相关研究,请酶切后再电泳
闹太套
4楼2008-07-28 21:32:36
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查看全部 6 个回答

liuzhenhai

铁杆木虫 (正式写手)

我佛慈悲!!!


fengzhiyong(金币+1,VIP+0):谢谢
楼主,你什么学校的?没有凝胶成像系统吗?质粒有三种存在形式:超螺旋,松弛型,开环。所以跑出两条带正常,但要注意判断大小是否正确!!!
2楼2008-07-28 19:56:45
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fengzhiyong

铜虫 (初入文坛)

我是个新手,多谢指教。
但是感觉哪条带比目的片断大很多,而且亮度也更亮,会是松弛型,开环的DNA吗?
3楼2008-07-28 20:09:12
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xyklmu

至尊木虫 (知名作家)

虫眼看世界


fengzhiyong(金币+1,VIP+0):谢谢
没错,这是质粒的不同形式,很有可能两条带跟你的预期都会有差异的,只要找一个单一切点的内切酶切开之后再跑电泳,切得完全的话,会得到一条带的,大小跟你的预期一致。
位卑未敢忘忧国。
5楼2008-07-29 00:42:04
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