24小时热门版块排行榜    

查看: 2282  |  回复: 30

易水秋寒

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看条带的大小不是RNA,更像是DNA
11楼2015-06-17 14:14:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

clive931

金虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 小茶91520 at 2015-06-17 08:47:54
是吗?oh, no !...

RNA提取我们都是啊冰浴操作的。65度10分钟是什么情况啊。

[ 发自小木虫客户端 ]
12楼2015-06-17 14:22:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

trizol11

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我在提取RNA的时候好像没有预热的过程吧,还需要低温操作呢,你65℃是不是把RNA降解了,
建议改进提取方法。
任重道远……
13楼2015-06-17 15:24:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lichj

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小茶91520: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-06-17 16:36:38
从图上看RNA明显降解了。不知道你的试剂是什么配方,植物中富含多酚和多糖,果实中多糖含量很高,用常用试剂通常效果不好,现在有很多文献,里面是一些改良方法,比如加入PVP除酚类物质,巯基乙醇防止氧化,licl是可以除多糖的,但是它在沉淀RNA的时候是选择性沉淀分子量大的RNA,一些低分子量的可能会丢失,你如果做小RNA,或tRNA类的研究最好不用此方法,可以用终浓度10%的乙醇离心去除多糖。多查查文献吧,我们提这一类的植物RNA都是自己配制的试剂,比试剂盒好一些。
14楼2015-06-17 15:39:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小茶91520

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by clive931 at 2015-06-17 14:22:07
RNA提取我们都是啊冰浴操作的。65度10分钟是什么情况啊。
...

这个是为了释放RNA吧?
15楼2015-06-17 16:12:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小茶91520

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by trizol11 at 2015-06-17 15:24:11
我在提取RNA的时候好像没有预热的过程吧,还需要低温操作呢,你65℃是不是把RNA降解了,
建议改进提取方法。

65℃水浴不是破坏细胞壁,释放RNA吗?
16楼2015-06-17 16:34:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小茶91520

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
14楼: Originally posted by lichj at 2015-06-17 15:39:15
从图上看RNA明显降解了。不知道你的试剂是什么配方,植物中富含多酚和多糖,果实中多糖含量很高,用常用试剂通常效果不好,现在有很多文献,里面是一些改良方法,比如加入PVP除酚类物质,巯基乙醇防止氧化,licl是可 ...

你好!非常感谢你的回答!我的配方如图
提取的RNA主要是做实时定量PCR
各位虫友能帮忙分析下我提取的果实RNA问题可能出在哪吗?
ctab.jpg

17楼2015-06-17 16:36:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhqingfang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你提取到的不是RNA,至少已经降解了。
实验忙碌中
18楼2015-06-17 16:37:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhqingfang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你改用 TrizolRNA提取试剂盒重新试试看,TAKARA
实验忙碌中
19楼2015-06-17 16:40:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

clive931

金虫 (小有名气)

引用回帖:
15楼: Originally posted by 小茶91520 at 2015-06-17 16:12:08
这个是为了释放RNA吧?...

液氮研磨不就是释放了吗。低温防止降解。我们做的是丝状真菌。

[ 发自小木虫客户端 ]
20楼2015-06-17 16:41:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小茶91520 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 东华理工大学化材专业26届硕士博士申请 +6 zlingli 2026-03-13 6/300 2026-03-15 20:00 by ryzcf
[考研] 东南大学364求调剂 +3 JasonYuiui 2026-03-15 3/150 2026-03-15 18:57 by 无际的草原
[考研] 070305求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-14 4/200 2026-03-15 11:04 by peike
[考研] 311求调剂 +3 26研0 2026-03-15 3/150 2026-03-15 09:12 by JourneyLucky
[考研] 云南财经大学信息学院计算机学硕专硕学位点 +3 zjptai 2026-03-10 5/250 2026-03-14 01:23 by 飞行琦
[考研] 265求调剂 +9 小木虫085600 2026-03-09 12/600 2026-03-14 01:11 by JourneyLucky
[基金申请] 有必要更换申报口吗 20+3 fannyamoy 2026-03-11 3/150 2026-03-14 00:52 by zhanghaozhu
[考研] 一志愿中科院,化学方向,295求调剂 +4 一氧二氮 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:35 by JourneyLucky
[考研] 求材料调剂 085600英一数二总分302 前三科235 精通机器学习 一志愿哈工大 +4 林yaxin 2026-03-12 4/200 2026-03-13 22:04 by 星空星月
[硕博家园] 085600 260分求调剂 +3 天空还下雨么 2026-03-13 5/250 2026-03-13 18:46 by 天空还下雨么
[考研] 求调剂 +7 18880831720 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:10 by JourneyLucky
[考研] 314求调剂 +7 无懈可击的巨人 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:40 by JourneyLucky
[考研] 328化工专硕求调剂 +4 。,。,。,。i 2026-03-12 4/200 2026-03-13 14:44 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +3 ADT 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:19 by peike
[考研] 283求调剂,材料、化工皆可 +8 苏打水7777 2026-03-11 10/500 2026-03-13 09:06 by Linda Hu
[考研] 333求调剂 +3 152697 2026-03-12 4/200 2026-03-13 07:08 by Iveryant
[考博] 2026年博士申请 +3 QwQwQW10 2026-03-11 3/150 2026-03-12 17:58 by gxch43
[考研] 收调剂 +7 调剂的考研学生 2026-03-10 7/350 2026-03-10 17:57 by 麦茶汤圆
[考研] 327分求调剂086 +4 西红柿?小帅 2026-03-09 7/350 2026-03-10 14:47 by ruiyingmiao
[考研] 一志愿山东大学,总分327,英语二79,有论文,有竞赛,已过四六级 +3 木木目目1 2026-03-09 3/150 2026-03-09 19:52 by yuningshan
信息提示
请填处理意见