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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 将酶修饰后加50%甘油保存，要进行下一步试验需要除去甘油吗？如何除去？
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njml

金虫 (小有名气)

[交流] 将酶修饰后加50%甘油保存，要进行下一步试验需要除去甘油吗？如何除去？

将酶修饰后加50%甘油保存，要进行下一步试验需要除去甘油吗？如何除去？
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1楼 2008-07-26 12:54:42
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xyklmu

至尊木虫 (知名作家)

虫眼看世界
关键看你下一步的试验是什么。
一般不需要去除甘油的，我们用的很多酶都是在甘油中保存的，像Taq酶和限制酶，酶的量一般加入很少的，对下一步的体系不会有大的影响的。
但是有谢限制酶有对甘油的量的要求，甘油太多了或者酶量太大，酶切时间过长都会出现star activity的
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位卑未敢忘忧国。
2楼2008-07-26 13:42:01
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njml

金虫 (小有名气)
谢谢你！
我在做抗体与酶的连接，用交联剂SPDP.先把酶用SPDP修饰，过Sephadex G25脱去多余的SPDP，浓缩后加50%甘油-20保存。
下一步是把酶与SPDP修饰过的抗体连接。
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3楼2008-07-27 00:01:12
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njml

金虫 (小有名气)
怎么没人回答呀
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4楼2008-07-28 14:53:24
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duanyongzhong

银虫 (正式写手)
需要去除甘油的,不去除会影响酶活,用透析的方法除去!
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5楼2008-07-28 16:57:24
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house

银虫 (正式写手)
超滤，如截留10KDa等的离心式超滤管，简单易用。whatman或millipore公司都有。
或是直接过分子筛，如 G50，G100等葡聚糖分子筛。
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6楼2008-07-29 09:46:05
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jqq1985

银虫 (正式写手)
如果反应体系足够大，甘油将被无限稀释，可以不考虑甘油 。
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7楼2008-08-01 12:46:02
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