应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 细胞单克隆
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
101/1返回列表
查看: 2349  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

洛水东流

新虫 (初入文坛)

[求助] 细胞单克隆 已有4人参与

最近在做细胞单克隆的筛选，就是从一群细胞中跳出来一个细胞，然后培养这一个细胞，让它增值分裂变为无数个，原理是这样，但是至今没有成功，，我把细胞稀释，然后放到96孔板里，但是要么没有，要么有几个，不知道怎么办，已经两个月了，求有经验的，做过的大神指导，求指导求帮助。谢了
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-06-14 21:50:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

璧月

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
曾经尝试做过。因为细胞状态不好就做了单克隆，就是计算一定体积内一个细胞，分到96孔板里面。
费眼神，超级费眼神。觉得麻烦就等一天两天，细胞长成小团了再看，这样容易些。挑一个孔一个细胞的记录下来。因为细胞很稀，几乎不用换液。
一个细胞长成一大团之后最好孔内传一次，免得长挤了。再次长满之后传到24孔板或6孔板。24孔长满就可以传25cm2的细胞瓶了。
当时的细胞还比较皮实，长得挺快。根据细胞的状况摸索吧。
赞一下 回复此楼
2楼2015-06-15 09:17:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

洛水东流

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 璧月 at 2015-06-15 09:17:27
曾经尝试做过。因为细胞状态不好就做了单克隆，就是计算一定体积内一个细胞，分到96孔板里面。
费眼神，超级费眼神。觉得麻烦就等一天两天，细胞长成小团了再看，这样容易些。挑一个孔一个细胞的记录下来。因为细胞 ...

谢谢

[ 发自小木虫客户端 ]
回复此楼
3楼2015-06-15 20:39:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

洛水东流

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 璧月 at 2015-06-15 09:17:27
曾经尝试做过。因为细胞状态不好就做了单克隆，就是计算一定体积内一个细胞，分到96孔板里面。
费眼神，超级费眼神。觉得麻烦就等一天两天，细胞长成小团了再看，这样容易些。挑一个孔一个细胞的记录下来。因为细胞 ...

我看显微镜脖子都快掉了，但是每个孔一个细胞的几率太小了，不知道有没有好一点的做法可以提高准确率？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
4楼2015-06-15 20:42:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

璧月

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
洛水东流: 金币+3, ★有帮助, 谢了 2015-06-16 20:26:11
引用回帖:
4楼: Originally posted by 洛水东流 at 2015-06-15 20:42:04
我看显微镜脖子都快掉了，但是每个孔一个细胞的几率太小了，不知道有没有好一点的做法可以提高准确率？
...

那就等一两天，细胞长成小团了看，低倍大体一看就能看到有没有。毕竟有的细胞虽然贴壁了，但是状态不好，长不起来。状态好的长挺快的，容易判断些。勤快点，多留意，别让细胞长太挤。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
5楼2015-06-16 05:07:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

siriusxuan

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

可以尝试用同种细胞使用过的培养基，过滤一下加到96孔板里面，可以帮助细胞生长，也可以在一个60的皿里面种100个细胞，然后等细胞长成聚落，用胰酶定点消化转接到稍微大点的培养环境。
赞一下 回复此楼
此座可言轻社稷，江山万里起风尘。
6楼2015-06-18 07:58:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

洛水东流

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by siriusxuan at 2015-06-18 07:58:10
可以尝试用同种细胞使用过的培养基，过滤一下加到96孔板里面，可以帮助细胞生长，也可以在一个60的皿里面种100个细胞，然后等细胞长成聚落，用胰酶定点消化转接到稍微大点的培养环境。

谢了

[ 发自小木虫客户端 ]
回复此楼
7楼2015-06-19 12:35:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HAS2323

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

有的孔有细胞，有的没有，可能是稀释的方式不对，细胞分布不均匀。 一般都是先计数，再倍比稀释

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
8楼2015-06-19 23:52:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cuiyongliang

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

不要怕浪费96孔板，否则就是浪费时间。先大概估计一下细胞数，然后梯度稀释，每个梯度稀释一个板子，最后你认为会是单个细胞的，多稀释块板子。稀释倍数可以是5-10倍。多铺板，肯定有单克隆。
赞一下 回复此楼
9楼2015-06-20 00:50:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

洛水东流

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by cuiyongliang at 2015-06-20 00:50:16
不要怕浪费96孔板，否则就是浪费时间。先大概估计一下细胞数，然后梯度稀释，每个梯度稀释一个板子，最后你认为会是单个细胞的，多稀释块板子。稀释倍数可以是5-10倍。多铺板，肯定有单克隆。

恩，谢了

[ 发自小木虫客户端 ]
回复此楼
10楼2015-06-22 00:14:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 洛水东流 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿北京工业大学，324分求调剂 +4 零八# 2026-03-28 4/200 2026-03-28 15:01 by 17865157980
[考研] 321求调剂 +6 材料cailiao 2026-03-21 6/300 2026-03-28 13:14 by 唐沐儿
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +8 邱gl 2026-03-27 8/400 2026-03-28 12:42 by 唐沐儿
[考研] 一志愿哈尔滨工业大学材料与化工方向336分 +8 辰沐5211314 2026-03-26 8/400 2026-03-28 11:25 by xuxiang
[考研] 085602 307分 求调剂 +7 不知道叫什么！ 2026-03-26 7/350 2026-03-28 09:57 by 神马都不懂
[考研] 求调剂推荐 材料 304 +15 荷包蛋hyj 2026-03-26 15/750 2026-03-28 04:13 by fmesaito
[考研] 一志愿211院校 344分 东北农业大学生物学学硕，求调剂 +5 丶风雪夜归人丶 2026-03-26 8/400 2026-03-27 19:22 by 丶风雪夜归人丶
[考研] 一志愿上海理工能源动力（085800）310分求调剂 +3 zhangmingc 2026-03-27 4/200 2026-03-27 19:01 by 给你你注意休息
[考研] 一志愿华东理工大学081700，初试分数271 +6 kotoko_ik 2026-03-23 7/350 2026-03-27 12:29 by 惠州彭于晏
[考研] 求调剂 +3 刘柯@ 2026-03-24 4/200 2026-03-27 11:28 by shangxh
[论文投稿] Journal of Mechanical Science and Technology +3 Russ_ss 2026-03-25 5/250 2026-03-27 10:49 by 陆小果画大饼
[考研] 359求调剂 +4 王了个楠 2026-03-25 4/200 2026-03-27 08:43 by 不吃魚的貓
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-03-26 4/200 2026-03-27 08:04 by chemisry
[考研] 351求调剂 +4 麦克阿磊 2026-03-24 4/200 2026-03-27 00:32 by wxiongid
[考研] 调剂 +4 柚柚yoyo 2026-03-26 4/200 2026-03-26 20:43 by fmesaito
[考研] 一志愿河工大 081700 276求调剂 +4 地球绕着太阳转 2026-03-23 4/200 2026-03-26 14:27 by zzll406
[考研] 290分调剂求助 +3 吉祥止止陈 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:58 by barlinike
[考研] 上海电力大学材料防护与新材料重点实验室招收调剂研究生（材料、化学、电化学，环境） +4 我爱学电池 2026-03-23 4/200 2026-03-25 00:59 by 1027_324
[考研] 一志愿南航材料专317分求调剂 +5 炸呀炸呀炸薯条 2026-03-23 5/250 2026-03-24 16:52 by 星空星月
[考研] 293求调剂 +3 涛涛Wjt 2026-03-22 5/250 2026-03-22 22:21 by jiangpengfei
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭