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renyanzhecll

木虫 (正式写手)

将军

应助: 4 (幼儿园)
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在线: 52.3小时
虫号: 426436
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性别: GG
专业: 基因表达调控与表观遗传学

[交流] 求助！

哪位高人可知道：PCR胶回收所得DNA浓度低的因素有哪些?

[ Last edited by 350784478 on 2009-7-16 at 20:41 ]

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一直在等你……

1楼 2008-07-25 22:15:01

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

BioEPI: 3
应助: 1 (幼儿园)
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虫号: 551611
注册: 2008-04-27
性别: GG
专业: 神经系统肿瘤（含特殊感受

1、切胶的时候，没切全
2、溶胶不充分，与柱子结合不充分（可以用2楼的方法，离心后别马上弃液，重新加入柱子再离）
3、乙醇（或者含乙醇的buffer）洗涤的时候，没有把乙醇离心离干净，或者挥发干净，另外，不小心把乙醇buffer碰到柱子底部，也会损失DNA
4、分次多步洗脱是个不错的方法
5、洗脱的buffer一定要好，试剂盒一般是用Tris-HCl，pH8左右的碱性溶液。用水洗脱请保证水略偏碱性。不建议用TE，因为EDTA可能会影响你的后续实验。