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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » TA克隆
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linglingys

新虫 (小有名气)

[求助] TA克隆 已有5人参与

各位虫友，TAKARA，TA克隆试剂盒，阳性对照连接反应30min，是否足够？目的片段1200bp左右也是连接30min。本人按试剂盒说明书，阳性对照和样品均不出现菌落，求解？
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1楼 2015-06-09 09:44:23
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linglingys

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by my_father at 2015-06-12 11:40:29
1200bp片段 你加了多少ng？不要讲多少μl，体积没有意义。
做连接主要是摩尔比！！
另外T4连接分平端、粘端、TA连接、其中TA连接效率最低，可以尝试4度连接

换一个感受态已经做出来，感谢你提的建议
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8楼2015-06-12 19:47:13
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五一长假

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
连接时间肯定是够了，这种情况可能是你操作过程中出现了问题，建议检查你的操作过程，并重新实验。
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2楼2015-06-09 11:33:29
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a13515517892

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
感谢参与，应助指数 +1
我建议你先检查实验是否都按照步骤来做的，甚至连接转化。没有菌落就是传说中的光板，
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3楼2015-06-09 13:10:26
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linglingys

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 五一长假 at 2015-06-09 11:33:29
连接时间肯定是够了，这种情况可能是你操作过程中出现了问题，建议检查你的操作过程，并重新实验。

已经重做，等待结果
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4楼2015-06-09 16:25:40
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