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小橘子2013

新虫 (小有名气)

引用回帖:
20楼: Originally posted by luwei13566 at 2015-06-12 14:57:44
甲醇母液浓度较低会让培养基体积升高,但是只要提前算好增加的体积以及与其相匹配的甲醇添加量,添加甲醇的终浓度一致就可以,对培养基影响并不是很大。...

这次刚做的酵母诱导我是每个BMGY是单瓶配完,灭菌后再加上YNB,生物素和磷酸钾缓冲液和10X甘油的。换培养基时我灭的空瓶子和一整瓶的BMMY(未加后续的东西),灭完菌后加的YNB,生物素,磷酸钾缓冲液,每个样用差不多30ml调OD600=1左右,之后按30ml总体积加的100%的甲醇,第一天300ul,第二天290ul,第三天280ul,第四天270ul。每天取1ml,收集上清直接跑sds-page..
我是想问这样做能行吗?用100%的甲醇与之前的10x甘油相比对整体的体积会不会有影响?
换培养基的时候怎样比较简单点?
简简单单才是真
21楼2015-06-17 08:59:41
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MattM

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by guoqin_shiyin at 2015-06-08 21:17:52
一般我们不会装满,装200微升就够了。。。。没必要装满,至于质粒,一般体积控制在5微升和酵母混合。。。感受态细胞多少其实不太重要,多点也没关系。酵母很好转
...

请问下你们做得酵母电转,转化效率高么,大概达到多少了?谢谢!
22楼2015-07-06 12:10:12
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guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)

引用回帖:
22楼: Originally posted by MattM at 2015-07-06 12:10:12
请问下你们做得酵母电转,转化效率高么,大概达到多少了?谢谢!...

非常高

[ 发自小木虫客户端 ]
23楼2015-07-06 17:32:37
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