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小橘子2013

新虫 (小有名气)

[求助] 酵母做电转时点转杯大小有关系吗 已有1人参与

最近在做酵母电转化，实验室只有0.4mm点转杯，想问一下需要用多少感受态和线性化后的质粒呢？
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简简单单才是真
1楼 2015-06-08 16:33:14
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luwei13566

木虫 (正式写手)
引用回帖:
18楼: Originally posted by 小橘子2013 at 2015-06-12 08:56:39
我的意思是 如果我想用100%甲醇去诱导每次就加几毫升，而原来的用10X甘油的时候是加十倍的量   对整体的体积和浓度会有影响吧  还是把甲醇也配成10%每次加1%这样应该对培养基的浓度不会有影响了吧...

甲醇母液浓度较低会让培养基体积升高，但是只要提前算好增加的体积以及与其相匹配的甲醇添加量，添加甲醇的终浓度一致就可以，对培养基影响并不是很大。
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大家相互帮助哈
20楼2015-06-12 14:57:44
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guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)
我们一般用0.2的或者0.1的，理论上大点影响也不是很多。

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2楼2015-06-08 19:15:19
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小橘子2013

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by guoqin_shiyin at 2015-06-08 19:15:19
我们一般用0.2的或者0.1的，理论上大点影响也不是很多。

我是想问 每个大小的杯子都有自己的容量吧  电转的话是都要装满吗  如果感受态和质粒不够的话  需要用什么补齐吗  山梨醇可以吗
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简简单单才是真
3楼2015-06-08 21:09:58
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guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小橘子2013 at 2015-06-08 21:09:58
我是想问 每个大小的杯子都有自己的容量吧  电转的话是都要装满吗  如果感受态和质粒不够的话  需要用什么补齐吗  山梨醇可以吗...

一般我们不会装满，装200微升就够了。。。。没必要装满，至于质粒，一般体积控制在5微升和酵母混合。。。感受态细胞多少其实不太重要，多点也没关系。酵母很好转

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4楼2015-06-08 21:17:52
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