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酵母做电转时点转杯大小有关系吗
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小橘子2013
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酵母做电转时点转杯大小有关系吗
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最近在做酵母电转化,实验室只有0.4mm点转杯,想问一下需要用多少感受态和线性化后的质粒呢?
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简简单单才是真
1楼
2015-06-08 16:33:14
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luwei13566
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18楼
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Originally posted by
小橘子2013
at 2015-06-12 08:56:39
我的意思是 如果我想用100%甲醇去诱导每次就加几毫升,而原来的用10X甘油的时候是加十倍的量 对整体的体积和浓度会有影响吧 还是把甲醇也配成10%每次加1%这样应该对培养基的浓度不会有影响了吧...
甲醇母液浓度较低会让培养基体积升高,但是只要提前算好增加的体积以及与其相匹配的甲醇添加量,添加甲醇的终浓度一致就可以,对培养基影响并不是很大。
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20楼
2015-06-12 14:57:44
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guoqin_shiyin
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我们一般用0.2的或者0.1的,理论上大点影响也不是很多。
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2楼
2015-06-08 19:15:19
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小橘子2013
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2楼
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guoqin_shiyin
at 2015-06-08 19:15:19
我们一般用0.2的或者0.1的,理论上大点影响也不是很多。
我是想问 每个大小的杯子都有自己的容量吧 电转的话是都要装满吗 如果感受态和质粒不够的话 需要用什么补齐吗 山梨醇可以吗
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简简单单才是真
3楼
2015-06-08 21:09:58
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guoqin_shiyin
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3楼
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小橘子2013
at 2015-06-08 21:09:58
我是想问 每个大小的杯子都有自己的容量吧 电转的话是都要装满吗 如果感受态和质粒不够的话 需要用什么补齐吗 山梨醇可以吗...
一般我们不会装满,装200微升就够了。。。。没必要装满,至于质粒,一般体积控制在5微升和酵母混合。。。感受态细胞多少其实不太重要,多点也没关系。酵母很好转
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4楼
2015-06-08 21:17:52
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