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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 资料求助 » 液相色谱峰峰很宽
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niu0520322

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by sunsh3 at 2015-06-09 11:32:01
如果是C18柱不能直接全用水吧
...

可以啊，水洗，但是不用的时候用有机溶剂保存，最后走乙腈不就可以了

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11楼2015-06-09 12:22:06
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mao877516786

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不清楚你这个问题解决了没，所以就说说自己的一点浅薄之见。一是配制新的流动相，因为磷酸盐缓冲液较容易生菌，最好当天配当天用。其次冲洗柱子，先用95%的纯水，乙腈冲上1小时，然后再换成100%乙腈冲洗30分钟，然后在置换成水相，再用你的流动相平衡上样，看看是不是有效果。
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12楼2015-06-09 12:49:26
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mao877516786

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by niu0520322 at 2015-06-09 12:22:06
可以啊，水洗，但是不用的时候用有机溶剂保存，最后走乙腈不就可以了
...

C18最好不要用100%纯水冲洗，可能会造成填料塌陷。
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13楼2015-06-09 12:50:47
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lwdlwd

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我做过头孢类物质分离，这玩意不稳定，现融现配，低温储藏，不要长时间放，注意ph变化

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幽默并非在于调侃他人，而是能否经得住调侃。
14楼2015-06-09 13:23:35
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kittyxiaoqun

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
色谱柱柱效不行了，可以将色谱柱反冲后进行试验
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15楼2015-06-09 15:22:27
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南之北至

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我认为是色谱柱堆积了残留物，你用纯乙腈冲洗一段时间，如果之前的样品比较杂，可能需要彻夜清洗（关闭检测灯），再实验的时候可以先不用预柱等，试试看峰会不会变尖

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16楼2015-06-09 16:20:36
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候鸟~北方

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以反冲一下试试～

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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17楼2015-06-09 16:30:27
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lionguy

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
将流动相中乙腈的比例加大，流速适当提高；再加入及少许的三乙胺扫尾。
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18楼2015-06-11 07:47:31
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fione_liu

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

尾巴长表明柱效下降，建议更换新的色谱柱。前面有连峰，没有分开，也可能是注销下降造成的。看你的流动相缓冲盐含量很大，而且是等度洗脱，很伤竹子的，每次用完要好好清洗柱子，延长柱子寿命
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19楼2015-06-11 16:35:46
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mingfengpbpb

木虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by mao877516786 at 2015-06-09 12:49:26
不清楚你这个问题解决了没，所以就说说自己的一点浅薄之见。一是配制新的流动相，因为磷酸盐缓冲液较容易生菌，最好当天配当天用。其次冲洗柱子，先用95%的纯水，乙腈冲上1小时，然后再换成100%乙腈冲洗30分钟，然后 ...

换了一根柱子，目前峰还可以。谢谢你了，受益匪浅，可能之前流动相有长菌吧，总是配一些用2-3天，样品也有些脏，柱效逐渐就下降了。
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自强不息
20楼2015-06-12 10:26:33
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