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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 想请问下关于Waters与Kromasil色谱柱
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Luommy

新虫 (初入文坛)

[求助] 想请问下关于Waters与Kromasil色谱柱 已有1人参与

想请教下：
现有一台Waters的UPLC，使用的是Kromasil-100-1.8-C18的色谱柱，用了一段时间色谱柱出现了一系列的问题，例如：柱压上升、出现开叉峰等。
想知道是不是使用的色谱柱不配套的原因导致的？
其实想问的是Kromasil 1.8um的色谱柱质量如何，粒径包括其他方面。有没有大神比较了解的。
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1楼 2015-06-05 14:43:46
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xuyingemail

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by archbishop at 2015-06-11 10:21:35
我的意思是如果是等度就可以先把两相混合好，这样避免了在仪器里混合缓冲盐析出。所以就是因为梯度洗脱所以缓冲盐才析出，你要么换别的缓冲盐，或者浓度降低，要么换柱子。...

没错，UPLC缓冲盐没必要浓度那么高，我认为比HPLC低10倍都可以的。
另外可以考虑在柱前加预柱，保护柱子。
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10楼2015-06-11 13:25:15
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
waters自己就卖UPLC的柱子。
你是不是用了什么缓冲盐之类的？
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
2楼2015-06-05 15:06:34
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匿名

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3楼2015-06-05 17:13:35
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Luommy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by archbishop at 2015-06-05 15:06:34
waters自己就卖UPLC的柱子。
你是不是用了什么缓冲盐之类的？

使用的磷酸盐，浓度较高，比较伤柱。
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4楼2015-06-08 17:00:06
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
引用回帖:
4楼: Originally posted by Luommy at 2015-06-08 17:00:06
使用的磷酸盐，浓度较高，比较伤柱。...

UPLC色谱柱粒径太小，用缓冲盐容易堵。因为柱效本身就很高，一般首选不加缓冲盐。
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
5楼2015-06-08 17:24:56
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Luommy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by archbishop at 2015-06-08 17:24:56
UPLC色谱柱粒径太小，用缓冲盐容易堵。因为柱效本身就很高，一般首选不加缓冲盐。...

可现在提供的检测方法就是使用的磷酸盐-乙腈的流动相，使用其他方法目的蛋白的峰无法分开，目前来看换流动相跟方法的可能性比较低。
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6楼2015-06-09 10:20:07
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
引用回帖:
6楼: Originally posted by Luommy at 2015-06-09 10:20:07
可现在提供的检测方法就是使用的磷酸盐-乙腈的流动相，使用其他方法目的蛋白的峰无法分开，目前来看换流动相跟方法的可能性比较低。...

如果是等度的话先把流动相混合好，再就是缓冲盐浓度调低一点。
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7楼2015-06-09 10:21:45
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Luommy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by archbishop at 2015-06-09 10:21:45
如果是等度的话先把流动相混合好，再就是缓冲盐浓度调低一点。...

时梯度洗脱程序，本身流速就低，等度混合不是很好混，且不易洗脱出来，现洗脱程序较长。
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8楼2015-06-11 10:00:36
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
引用回帖:
8楼: Originally posted by Luommy at 2015-06-11 10:00:36
时梯度洗脱程序，本身流速就低，等度混合不是很好混，且不易洗脱出来，现洗脱程序较长。...

我的意思是如果是等度就可以先把两相混合好，这样避免了在仪器里混合缓冲盐析出。所以就是因为梯度洗脱所以缓冲盐才析出，你要么换别的缓冲盐，或者浓度降低，要么换柱子。
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9楼2015-06-11 10:21:35
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