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aimeiaimei

银虫 (正式写手)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 6.8
帖子: 385
在线: 96.2小时
虫号: 473224
注册: 2007-12-05
性别: MM
专业: 森林培育学

[交流] 电泳求助

大家好，俺最近做PCR 电泳老是不顺利，不是没带，不清晰，就是有带弯曲，不好记录！换了新的缓冲，也没什么效果，很烦，帮帮忙吧？？谢谢啦

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疑惑？已经有5人回复

生活是在风雨中快乐跳舞

1楼 2008-07-22 23:00:08

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

BioEPI: 3
应助: 1 (幼儿园)
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散金: 9
红花: 13
帖子: 4032
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注册: 2008-04-27
性别: GG
专业: 神经系统肿瘤（含特殊感受

★ ★ ★ ★
reasonspare(金币+4,VIP+0):谢谢分享，欢迎常来

1、胶没凝好，不均匀
2、电压太高（跑得太快图很丑）或者太低（太慢发热容易降解）
3、胶是用buffer配的吧……用水配很容易出现这种问题
4、确定buffer真的是ok的？稀释倍数对否？一般是0.5*TBE，或者1*TAE
5、确保你的溶液用水都是纯净水（去离子），不要用矿泉水
6、不清晰或者没带是否是染色引起的？预染法，EB是1：20000加入胶，后染法确保染的时间够以及洗得够干净。
7、UV成像时间太长，会分解EB导致荧光淬灭

暂时想到这么多……