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xuelingsky

银虫 (初入文坛)

[交流] 洗色谱柱

液想色谱用了缓冲盐之后,正确的洗法是什么?是不是用低浓度的流动相先洗呀?
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yanghanrong

金虫 (正式写手)

★ ★
wingcat(金币+2,VIP+0):谢谢
做完缓冲盐后,一般是先用水-甲醇或者乙腈体系5%的低洗脱强度流动相冲洗段时间20-30min,至于准确的时间的长短,要看你的柱子和以前所用的缓冲体系决定。然后再慢慢将体系洗脱强度提高至含甲醇或者乙腈体100%,这个好办,在检测信号上比较直观,当基线能够完全走平的时候,那些强保留物质就可以说基本上完全冲洗出来了。
     我们考虑到的是溶解性的问题,水的含量越高,对缓冲盐的溶解性越好,所以也就越能将色谱柱前端存留的缓冲盐溶解而带走。但是,建议的是最好不要用完全100%水做单一的流动相体系,因为这样对ODS的浸渍能力有所损害,最好在最低的时候5%。
2楼2008-07-22 21:22:21
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aswman08

铜虫 (小有名气)

2楼的说得很对,一般C18柱,有机相的比例不能低于5%
3楼2008-07-23 09:35:39
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hyj8226

银虫 (小有名气)


wingcat(金币+1,VIP+0):谢谢
用完后,还要注意清洗柱塞杆和密封垫
有些仪器是自动清洗的,有些需要手动清洗
4楼2008-07-23 11:29:48
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xuelingsky

银虫 (初入文坛)

大家说的太对了,我也是这样想的,我一般都是用10%的乙腈先洗的,可是我们的领导非不要我这样洗,说我浓度太低了,洗了不好,我真是想不明白。他说,缓冲盐的浓度是多少,洗液就配多少,我们有的缓冲盐是80%的,他就叫我配80%的先洗,我真是郁闷。
5楼2008-07-24 19:06:38
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yanghanrong

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by xuelingsky at 2008-7-24 19:06:
大家说的太对了,我也是这样想的,我一般都是用10%的乙腈先洗的,可是我们的领导非不要我这样洗,说我浓度太低了,洗了不好,我真是想不明白。他说,缓冲盐的浓度是多少,洗液就配多少,我们有的缓冲盐是80%的,他 ...

你怎么不跟 你们领导说说你的看法 啊 ,呵呵
6楼2008-07-24 21:46:39
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zhaojunji06

铜虫 (小有名气)

采用梯度程序洗脱。一般先用低含量的有机试剂冲洗,再逐渐增加有机试剂的含量。
7楼2008-07-25 09:26:53
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platto

木虫 (著名写手)

一窍不通


wingcat(金币+1,VIP+0):谢谢
严禁用纯水冲洗。另外柱头还有泵的推杆后端最好也能够清洗清洗一下,有些设备带有自动清洗功能的。
七窍通了六窍
8楼2008-07-25 09:58:00
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aswman08

铜虫 (小有名气)


wingcat(金币+1,VIP+0):谢谢
最好是先打开PUSH阀,用水大流速先清洗一下系统,如果过柱子,有机相不得少于5%。
9楼2008-07-26 19:57:55
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