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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 不小心被紫外照射后的DNA，有什么补救方法吗？？急求！
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494750284

木虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by fahai at 2015-06-02 08:40:47
用普通光照，细菌经紫外照射诱变后，可以用普通白光照射，DNA具有一定光照修复的能力，可减少突变概率。但你这个纯的DNA不知道可不可以这样做。

看你的回复，觉得很奇怪。专门去查了一下。所谓的光修复是需要有光解酶事先结合DNA的，之后才是特定波长的光激活酶、修复。你这。。。。。。。。。
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11楼2015-06-02 09:10:10
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494750284

木虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 494750284 at 2015-06-02 09:10:10
看你的回复，觉得很奇怪。专门去查了一下。所谓的光修复是需要有光解酶事先结合DNA的，之后才是特定波长的光激活酶、修复。你这。。。。。。。。。...

你这应该不行。
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12楼2015-06-02 09:13:14
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caihang

铜虫 (小有名气)
重新提吧，绕一大段弯路，到了最后还是要重新提DNA，耗费的时间和精力更多。不就是100个DNA样本吗两三个试剂盒，也不是很费钱啊。
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13楼2015-06-02 10:24:43
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luwei13566

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by lxzk at 2015-06-02 03:18:56
可以使用CPD photolyase和(6-4)PP photolyase 修复两种嘧啶二聚体。不过这两种酶没有商品化，你没有办法搞到的话也可以用NEB的PreCR Repair Mix，可以修复CPD，不能修复(6-4)PP。不过CPD比(6-4)PP要多5到10倍，能把 ...

用试剂盒修复后的模板也不能保证一定能用，还不如用买那个的钱多买几盒提基因组试剂盒重新提，关键是保险。

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大家相互帮助哈
14楼2015-06-02 16:15:42
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soarshining

捐助贵宾 (著名写手)
不明白你说的紫外是指培养细菌的时候放在紫外线下么？那突变了肯定不能用。如果是成品没有什么关系啊。

另外，DNA多了并不会使得pcr结果变得更好，按照习惯的反应体系就差不多，除非你整个体系等比例扩大。
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15楼2015-06-02 16:32:53
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women0517

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by soarshining at 2015-06-02 16:32:53
不明白你说的紫外是指培养细菌的时候放在紫外线下么？那突变了肯定不能用。如果是成品没有什么关系啊。

另外，DNA多了并不会使得pcr结果变得更好，按照习惯的反应体系就差不多，除非你整个体系等比例扩大。

是提取的DNA。。
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16楼2015-06-02 19:25:18
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lxzk

木虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 494750284 at 2015-06-02 09:10:10
看你的回复，觉得很奇怪。专门去查了一下。所谓的光修复是需要有光解酶事先结合DNA的，之后才是特定波长的光激活酶、修复。你这。。。。。。。。。...

请看我的回复，光解酶photolyase还是很高效的，问题是没有商品化。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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17楼2015-06-02 22:21:15
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soarshining

捐助贵宾 (著名写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by women0517 at 2015-06-02 19:25:18
是提取的DNA。。...

用什么提的，按道理试剂盒提取的不会被紫外线破坏啊。更何况一般提取后都是冷冻的

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18楼2015-06-03 02:15:30
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ccqqsunshine

金虫 (正式写手)
光修复听说过吧，蓝光效率高哈哈，不然晒会儿太阳也ok

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19楼2015-06-03 08:08:53
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表弟爱网游

金虫 (小有名气)
重做一次，下次要小心同样的失误。就算是切胶回收DNA，长时间在紫外下照射回收效率都会很低，紫外长时间照射都会对DNA造成损伤。
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当一切如飞舞的落叶坠落，惋惜之余，也要学会原谅与释怀
20楼2015-06-03 11:09:24
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