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求助GR-DTNB循环法测定谷胱甘肽库的一些问题
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| 最近在测植物组织中谷胱甘肽库的量,采用的是分光光度计测定412nm处的吸光值。基本原理同GSH测定,在此基础上加入GR酶将GSSG还原成GSH,循环反复致使产物TNB增加,吸光值增加。方法中写GSH和GSSG交替,总量不变。要测定3min时的吸光值,有的测定的是4min时的吸光值,想问为什么是3或4min,这个时间是怎么确定的?我在测定时发现3min后吸光值还是在增加的,但一定时间后开始下降。已经做了谷胱甘肽的标准曲线,是将3min时的吸光值带入还是将3min内吸光值的变化率带入求得的是谷胱甘肽库?求大神帮忙答疑解惑,小生不胜感激! |
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