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tianlizi

新虫 (初入文坛)

[求助] 怎样从中药中分离出黄酮类化合物? 已有5人参与

黄酮类化合物的提取分离常用的方法,洗脱液和层析液的配比,有没有专业的,很急得

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一生随袁

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
黄酮化合物 随结构中含糖部分多少分为脂溶性(苷元)和水溶性部分,你可以用70%乙醇回流提取,提取后浓缩回收乙醇,之后水-醋酸乙酯进行萃取,水层主要是黄酮苷类成分,醋酸乙酯部分为苷元部分成分,你可以将这两部分干燥后,初步进行下抗氧化活性研究,看看这两部分那部分抗氧化活性比较高。
如果水层部分活性较高,重点研究水层部分,将水层部分用大孔树脂纯化,分别用水-30%乙醇-50%乙醇-70%乙醇-95%乙醇洗脱,之后你可以将不同洗脱部位做下抗氧化研究,如果50%乙醇活性高作为重点研究部分,可将该部分干燥后,用甲醇溶解,之后100~200目硅胶进行拌样(将样品吸附在硅胶上,此部分硅胶不能用太少,如果上样黏度过大,可能在洗脱过程中发生堵塞柱子),我一般愿意用氯仿-甲醇-水系统,梯度可以从8:2:0.2, 7:3:0.5,6:4:1,5:5:1 这几个梯度洗脱,我个人觉得既然是水溶性的,没必要用氯仿-甲醇 99:1这样的低洗脱溶剂洗脱硅胶柱,收集硅胶洗脱流分,干燥,并点薄层板,将TLC行为一致的流分合并,合并流分你可以选择继续硅胶柱层析,或是用SephadexLH-20纯化,流动相为MeOH(我不习惯用MeOH-H2O系统),流速要慢,之后一步就是ODS-C18纯化,流动相MeOH-H2O,比例自己根据实际情况摸索吧!收集流分,薄层检测,合并TLC行为一致的流分,如果运气好,能析出结晶,如果分子结构中连接糖数较多,不易结晶,就要用到制备液相分离,黄酮化合物是比较好纯化到单体的化合物,得到单体,难度不大,希望楼主要有信心。

至于最初乙酸乙酯萃取部分,可以将乙酸乙酯回收至干燥,甲醇溶解过滤后,硅胶柱色谱纯化,过程同上,进一步也是应用SephadexLH-20(根据极性,可能用到MeOH-氯仿 1:1系统)、ODS-C18纯化、制备液相纯化。
10楼2015-05-29 16:02:32
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普通回帖

lhg0209asd

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
黄酮提取分离算是比较常规的,你说的信息太少,目的也不明确,无法提供更多帮助
2楼2015-05-27 16:27:41
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tianlizi

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lhg0209asd at 2015-05-27 16:27:41
黄酮提取分离算是比较常规的,你说的信息太少,目的也不明确,无法提供更多帮助

您就把常规的方法给我说下,目的就是分离出出总得黄酮类化合物,然后从总的里面分出单体,最后用分离出来的做一些抗氧化的药理实验,谢谢了!

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2015-05-28 10:45:51
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lhg0209asd

银虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by tianlizi at 2015-05-28 10:45:51
您就把常规的方法给我说下,目的就是分离出出总得黄酮类化合物,然后从总的里面分出单体,最后用分离出来的做一些抗氧化的药理实验,谢谢了!
...

50%-80%乙醇提取,浓缩后过大孔树脂分段洗脱,得到总黄酮苷和总黄酮部位,再进行硅胶、凝胶等分离,更多你去参考文献
4楼2015-05-28 11:46:39
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tianlizi

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lhg0209asd at 2015-05-28 11:46:39
50%-80%乙醇提取,浓缩后过大孔树脂分段洗脱,得到总黄酮苷和总黄酮部位,再进行硅胶、凝胶等分离,更多你去参考文献...

您说的这些我都知道啊

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2015-05-28 12:15:52
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
其实更细节的需要自己多摸索了,建议还是实战吧。
归零
6楼2015-05-28 13:16:46
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zhangmin133

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by tianlizi at 2015-05-28 10:45:51
您就把常规的方法给我说下,目的就是分离出出总得黄酮类化合物,然后从总的里面分出单体,最后用分离出来的做一些抗氧化的药理实验,谢谢了!
...

一般都是60%左右的乙醇提取,然后浓缩,可以过大孔树脂,或着,用不同极性的溶剂萃取,萃取物再用正反向硅胶、凝胶、聚酰胺,分离纯化,有条件还可以上制备液相或半制备液相,本人原来做过,不过主要用聚酰胺和反向交替分离纯化,及制备液相做的相对较多
只为学习
7楼2015-05-29 09:44:03
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lovebadou

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
富集黄酮用聚酰胺呀,这是天然药化的常识吧。
8楼2015-05-29 11:39:28
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lxt0312

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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一般用40-60%乙醇提取,浓缩。
9楼2015-05-29 13:13:47
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