| 查看: 1409 | 回复: 8 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
guoqin_shiyin银虫 (正式写手)
|
[求助]
副溶血弧菌基因敲除蔗糖反向筛选长出的菌落很怪
|
|
|
采用自杀载体敲除副溶的基因,第一次重组得到氯霉素抗性的重组子,第二次重组在10%蔗糖平板上长出来大个的像液滴一样的菌落,担心是污染,不涂布直接点接蔗糖平板,得到同样结果;该菌落在氯霉素平板不长,担心蔗糖浓度不对,做了浓度梯度,从7%一直到16%,每个平板上都是长出的这个样子的菌落,PCR无目的片段.这个菌落点接在科玛嘉平板,绝大部分都不长,长出的几个居然是蓝色的......真心无语了....明明第一轮重组得到的结合子科玛嘉点上去是紫红色的,可是经过一轮蔗糖平板,得到古怪菌落,点击科玛嘉又变成蓝色... 真心求助各位大神,到底是为什么? 怀疑污染的话,应该不太可能了,因为是反复划线纯化挑取单斑了......而且对第一轮得到的结合子也做了副溶的PCR鉴定,TDH,toxr基因都扩增出来了..... 这个水滴状的菌落会不会是SacB基因其实没丢,把菌搞死了? |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有187人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
8楼2015-12-30 16:16:53
2楼2015-06-16 15:05:51
guoqin_shiyin
银虫 (正式写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 0.4
- 散金: 57
- 红花: 3
- 帖子: 876
- 在线: 51.7小时
- 虫号: 163332
- 注册: 2006-01-11
- 性别: MM
- 专业: 微生物
4楼2015-06-17 15:04:38
5楼2015-06-18 11:11:53