24小时热门版块排行榜    

查看: 1508  |  回复: 8

diedieyi

新虫 (小有名气)

[交流] 基因工程同时导入两个目的基因有前辈做过吗?小硕求助! 已有1人参与

导师让我做导入双基因的基因工程,实验室有师姐做过单基因导入,不过她还有一个月就毕业了,我在她身上估计没有机会学到什么东西了。实验室其他人没有什么基础。我好焦虑,担心太难做了,以至于硕士三年发不出文章。我很想发文章。做单基因导入的师姐劝我不要做这个,说偶然性太大,不好做,怕三年就一事无成了。师兄没有做基因工程,他做的是蛋白组学,他说师姐之所以这么说是因为她目的是去考公务员,志向不在这里,因此觉得难做,他鼓励我坚持调研基因工程,说做出来就牛掰掰。我对硕士生涯要求不高,只求多发文章。求做过基因工程的前辈们指点指点我,究竟要不要试试。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mazhenggen

铁虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
diedieyi: 金币+4 2015-05-26 21:52:42
你用的是什么宿主细胞呢,导入多个基因的技术很久以前就很成熟了,有单启动子多基因,多启动子多基因。当然啦,基因越多难度可能越大,但是两个基因是没有问题的,不用担心,好好做吧。弱弱的问一下,你们实验室分子生物方面是不是做的比较少呢?

[ 发自小木虫客户端 ]
我喜欢所以我做
2楼2015-05-24 09:25:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

diedieyi

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by mazhenggen at 2015-05-24 09:25:56
你用的是什么宿主细胞呢,导入多个基因的技术很久以前就很成熟了,有单启动子多基因,多启动子多基因。当然啦,基因越多难度可能越大,但是两个基因是没有问题的,不用担心,好好做吧。弱弱的问一下,你们实验室分子 ...

大肠杆菌,做污水处理方面。我们实验室目前没有做基因工程的了,请问前辈您做过基因工程吗,做的是哪方面的?

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2015-05-24 09:38:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mazhenggen

铁虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by diedieyi at 2015-05-24 09:38:55
大肠杆菌,做污水处理方面。我们实验室目前没有做基因工程的了,请问前辈您做过基因工程吗,做的是哪方面的?

...

主要做重组蛋白、酶、抗体研究,原核表达和真核表达都做过。大肠杆菌导入两个基因比较好操作,只要选择适合的载体就好了,只不过要确保你的蛋白能够在大肠杆菌中正确的折叠,一般小点的蛋白和结构不复杂的可以很好的在大肠杆菌中可溶表达。导入基因的目的是让其表达,大肠杆菌的表达一般都是通过质粒来实现,也有导入基因组的,但不常用。建议你先看看分子生物学方面的书籍和相关资料,掌握基因工程菌株构建方法。

[ 发自小木虫客户端 ]
我喜欢所以我做
4楼2015-05-24 11:15:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

diedieyi

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by mazhenggen at 2015-05-24 11:15:42
主要做重组蛋白、酶、抗体研究,原核表达和真核表达都做过。大肠杆菌导入两个基因比较好操作,只要选择适合的载体就好了,只不过要确保你的蛋白能够在大肠杆菌中正确的折叠,一般小点的蛋白和结构不复杂的可以很好 ...

谢谢您,这么一说我稍微找到一些勇气了。

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2015-05-24 12:26:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
diedieyi: 金币+1 2015-05-26 21:52:56
导入多个基因很简单啊,可以构建在一个载体上,也可以在两个载体上共表达,没什么的

[ 发自小木虫客户端 ]
6楼2015-05-24 17:06:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

diedieyi

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by guoqin_shiyin at 2015-05-24 17:06:39
导入多个基因很简单啊,可以构建在一个载体上,也可以在两个载体上共表达,没什么的

请问怎么入门?

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2015-05-25 07:01:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

reallpf

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
怎么入门?就是一直转,转了再转!大肠转入3-4个基因都是没问题的;做代谢途径改造的,转的更多,一环扣一环,野生菌能转好几个基因还得再敲除几个基因。
8楼2015-05-27 10:48:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by diedieyi at 2015-05-25 07:01:46
请问怎么入门?
...

入门就是埋头苦干,切啊连啊,没窍门。手熟就好

[ 发自小木虫客户端 ]
9楼2015-05-27 20:13:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 diedieyi 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:25 by pswait
[考研] 一志愿211 初试270分 求调剂 +4 谷雨上岸 2026-03-23 5/250 2026-03-23 21:18 by 不惑可乐
[考研] 化学308分求调剂 +3 你好明天你好 2026-03-23 3/150 2026-03-23 20:11 by macy2011
[考研] 生物学一志愿985,分数349求调剂 +6 zxts12 2026-03-21 9/450 2026-03-23 18:37 by macy2011
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
[考研] 一志愿中国石油大学(华东) 本科齐鲁工业大学 +4 石能伟 2026-03-17 4/200 2026-03-23 17:51 by 17862566385
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +8 困于星晨 2026-03-17 10/500 2026-03-23 13:05 by 醉在风里
[考研] 315分,诚求调剂,材料与化工085600 +3 13756423260 2026-03-22 3/150 2026-03-22 20:11 by edmund7
[考研] 319求调剂 +4 小力气珂珂 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:53 by ColorlessPI
[考研] 269专硕求调剂 +6 金恩贝 2026-03-21 6/300 2026-03-22 14:31 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +7 Auroracx 2026-03-22 7/350 2026-03-22 12:38 by 素颜倾城1988
[考研] 考研调剂 +4 来好运来来来 2026-03-21 4/200 2026-03-22 12:15 by 星空星月
[考研] 280求调剂 +11 咕噜晓晓 2026-03-18 12/600 2026-03-21 22:40 by ACS Nano——
[考研] 278求调剂 +9 烟火先于春 2026-03-17 9/450 2026-03-21 17:47 by 学员8dgXkO
[考研] 302求调剂 +12 呼呼呼。。。。 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:29 by ColorlessPI
[考研] 085700资源与环境308求调剂 +12 墨墨漠 2026-03-18 13/650 2026-03-21 01:42 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中科技大学,080502,354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:32 by JourneyLucky
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +22 rare12345 2026-03-18 22/1100 2026-03-20 20:39 by zhukairuo
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 12/600 2026-03-20 12:25 by lidianxing
信息提示
请填处理意见