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[交流] BAEE做底物测定酶活

各位大神 我现在要测定木瓜蛋白酶酶活,文献上是用1.5mL BAEE做底物,0.5mL DTT激活剂,加上1毫升酶液,在3min 钟内测定吸光值。现在由于我对酶进行了某手段的包埋变成不溶性颗粒,我在测酶活的时候对文献的方法进行了改良 :3mL 底物,1ML激活剂,然后把2mg 包埋的酶加入到2mL PBS中(相当于把它视为2mL 均匀的酶液)然后反应五分钟,测定吸光度的值,我想问在计算酶活的时候应该如何计算啊,在图中的公式里稀释倍数要把反应液的总体积(6mL)计算入内吗??跪求大神们帮帮忙啊!!!

BAEE做底物测定酶活
IMG_2959.JPG
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