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jianwu118

至尊木虫 (著名写手)

[交流] 求助:吹打细胞和细胞冻存液

我现在在养一种贴壁细胞,只是细胞消化后还是不好吹下来,想问问各位养细胞的前辈你们有什么好办法吹细胞,恩,是用弯头吸管还是直头的;
还有一个关于细胞培养的问题是:我养的这种细胞用的血清是国产的四季青血清,不知道冻存细胞时冻存液里的是不是加这种血清,还是要用更好的像国外进口的那种配冻存液?

希望各位前辈能多多指点小生,在此先多谢多谢!  
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zhangfu2008

金虫 (小有名气)

冻存血清与培养时的血清最好一致,保持整个体系的稳定性与持续性,同时吹打一般用直头的多,可以适当的延长下消化时间
2楼2008-07-18 12:31:56
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taotao4108

金虫 (正式写手)

无理

吹打最好还是用弯头的,用起来更为方便
血清四季青就可以了,我就用的四季青,冻存液是7:2:1(培养液,血清,DMSO)
至于你细胞不好消化,不知道你用的多大比例的胰酶消化液,0.25%?还是,如果是0.25%消化效果还不好的话,你可以采用TE消化液,就是加EDTA,具体配方很多,你随便就可以查到
3楼2008-07-18 13:39:58
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jianwu118

至尊木虫 (著名写手)

谢谢前面两位前辈的指点  我的细胞消化还不是很大问题  就是吹细胞的弯头滴管不是很好弄  因为我做的量不是很大  所以不是很想自己定做弯头滴管 本来是想找那种一次性的弯头滴管 只是现在还没打听到    恩   直头滴管能吹细胞吗?  
各位前辈  你们是怎么吹细胞的?   
4楼2008-07-19 16:12:49
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taotao4108

金虫 (正式写手)

无理

直的也可以吹
我现在一般都不用滴管吹了
消化把握的好,然后直接用1000的枪吹一吹就好了
呵呵
5楼2008-07-19 22:40:23
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

其实用枪吹也是不错的
如果你的细胞比较脆弱,还可以用剪掉一点点尖端的枪头来吹(记得在枪盒上面标明类似于cut一类的标记啊,不然其他人用的时候就囧了~~)
6楼2008-07-20 00:03:50
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jianwu118

至尊木虫 (著名写手)

这个我也想过  但是用枪吹的话怕污染啊  因为我的培养瓶是那种底面积为75平方厘米的大瓶子  不是很好吹  
7楼2008-07-20 17:35:34
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dangyr

金虫 (小有名气)

弯头滴管可以自己用普通的玻璃直管在酒精灯上烧制的,即:离滴管嘴部约1CM处对准外焰烧10S左右,用另一滴管下压所烧滴管的嘴部,待其成一定弯度时移离火焰,即成弯头滴管。个人觉得吹打培养瓶的细胞还是用弯头滴管更好,每个角度都能吹到的!
引用回帖:
Originally posted by jianwu118 at 2008-7-19 16:12:
谢谢前面两位前辈的指点  我的细胞消化还不是很大问题  就是吹细胞的弯头滴管不是很好弄  因为我做的量不是很大  所以不是很想自己定做弯头滴管 本来是想找那种一次性的弯头滴管 只是现在还没打听到    恩   直头 ...

8楼2008-07-21 10:32:29
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jianwu118

至尊木虫 (著名写手)

这个---  我的用量还有点大  如果真要的话到时可以找人定做的  谢谢dangyr 的提议   
9楼2008-07-21 14:49:34
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dangyr

金虫 (小有名气)

自己烧下还是挺方便的啦,省成本哈~
引用回帖:
Originally posted by jianwu118 at 2008-7-21 14:49:
这个---  我的用量还有点大  如果真要的话到时可以找人定做的  谢谢dangyr 的提议   

10楼2008-07-21 15:12:47
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