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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助：吹打细胞和细胞冻存液
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jianwu118

至尊木虫 (著名写手)

[交流] 求助：吹打细胞和细胞冻存液

我现在在养一种贴壁细胞，只是细胞消化后还是不好吹下来，想问问各位养细胞的前辈你们有什么好办法吹细胞，恩，是用弯头吸管还是直头的；
还有一个关于细胞培养的问题是：我养的这种细胞用的血清是国产的四季青血清，不知道冻存细胞时冻存液里的是不是加这种血清，还是要用更好的像国外进口的那种配冻存液？

希望各位前辈能多多指点小生，在此先多谢多谢！  
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1楼 2008-07-18 10:36:13
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zhangfu2008

金虫 (小有名气)
冻存血清与培养时的血清最好一致，保持整个体系的稳定性与持续性，同时吹打一般用直头的多，可以适当的延长下消化时间
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2楼2008-07-18 12:31:56
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taotao4108

金虫 (正式写手)

无理
吹打最好还是用弯头的，用起来更为方便
血清四季青就可以了，我就用的四季青，冻存液是7：2：1（培养液，血清，DMSO）
至于你细胞不好消化，不知道你用的多大比例的胰酶消化液，0.25％？还是，如果是0.25％消化效果还不好的话，你可以采用TE消化液，就是加EDTA，具体配方很多，你随便就可以查到
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3楼2008-07-18 13:39:58
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jianwu118

至尊木虫 (著名写手)
谢谢前面两位前辈的指点  我的细胞消化还不是很大问题  就是吹细胞的弯头滴管不是很好弄  因为我做的量不是很大  所以不是很想自己定做弯头滴管 本来是想找那种一次性的弯头滴管 只是现在还没打听到    恩   直头滴管能吹细胞吗？  
各位前辈  你们是怎么吹细胞的？   
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4楼2008-07-19 16:12:49
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taotao4108

金虫 (正式写手)

无理
直的也可以吹
我现在一般都不用滴管吹了
消化把握的好，然后直接用1000的枪吹一吹就好了
呵呵
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5楼2008-07-19 22:40:23
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
其实用枪吹也是不错的
如果你的细胞比较脆弱，还可以用剪掉一点点尖端的枪头来吹（记得在枪盒上面标明类似于cut一类的标记啊，不然其他人用的时候就囧了~~）
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6楼2008-07-20 00:03:50
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jianwu118

至尊木虫 (著名写手)
这个我也想过  但是用枪吹的话怕污染啊  因为我的培养瓶是那种底面积为75平方厘米的大瓶子  不是很好吹  
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7楼2008-07-20 17:35:34
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dangyr

金虫 (小有名气)
弯头滴管可以自己用普通的玻璃直管在酒精灯上烧制的，即：离滴管嘴部约1CM处对准外焰烧10S左右，用另一滴管下压所烧滴管的嘴部，待其成一定弯度时移离火焰，即成弯头滴管。个人觉得吹打培养瓶的细胞还是用弯头滴管更好，每个角度都能吹到的！
引用回帖:
Originally posted by jianwu118 at 2008-7-19 16:12:
谢谢前面两位前辈的指点  我的细胞消化还不是很大问题  就是吹细胞的弯头滴管不是很好弄  因为我做的量不是很大  所以不是很想自己定做弯头滴管 本来是想找那种一次性的弯头滴管 只是现在还没打听到    恩   直头 ...

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8楼2008-07-21 10:32:29
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jianwu118

至尊木虫 (著名写手)
这个---  我的用量还有点大  如果真要的话到时可以找人定做的  谢谢dangyr 的提议   
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9楼2008-07-21 14:49:34
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dangyr

金虫 (小有名气)
自己烧下还是挺方便的啦，省成本哈~
引用回帖:
Originally posted by jianwu118 at 2008-7-21 14:49:
这个---  我的用量还有点大  如果真要的话到时可以找人定做的  谢谢dangyr 的提议   

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10楼2008-07-21 15:12:47
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