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875737697

新虫 (小有名气)

[求助] 酵母双杂交

我是研一小硕,老板让我做互作蛋白,但之前也没有人做过,我看了很多文献,有以下2个问题,希望路过的大侠拔刀相助:
① 为什么有的文献里是构建含已知蛋白基因的bait载体和含cDNA文库的Prey载体,然后共转化AH109细胞;但是有的却是将两种不同的载体转入不同的酵母细胞,然后让两者进行mating,到底是哪种方法呀?(◎﹏◎)
②最后的筛选用的各种平板,如SD\-His\-Leu\-Trp 培养基,SD\-Ade\-His\-Leu\-Trp培养基原理是什么呀?搞不懂原理看一会儿就被绕晕了...
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

对于第一个问题,共转化的筛选效率略高,第二个问题,你还是静下心好好看原版的操作手册吧,没有什么捷径

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-05-24 12:20:27
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生物非专业

新虫 (初入文坛)

楼主我现在可能就是当年的你,研一小白,想交流下,不知可以给个联系放弃吗

发自小木虫Android客户端
3楼2017-08-13 20:18:35
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未来……

新虫 (正式写手)

引用回帖:
1楼: Originally posted by 875737697 at 2015-05-22 16:20:04
我是研一小硕,老板让我做互作蛋白,但之前也没有人做过,我看了很多文献,有以下2个问题,希望路过的大侠拔刀相助:
① 为什么有的文献里是构建含已知蛋白基因的bait载体和含cDNA文库的Prey载体,然后共转化AH109 ...

请问你能给我讲讲酵母双杂交其原理不?

发自小木虫IOS客户端
4楼2018-07-10 22:42:06
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