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875737697新虫 (小有名气)
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酵母双杂交
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我是研一小硕,老板让我做互作蛋白,但之前也没有人做过,我看了很多文献,有以下2个问题,希望路过的大侠拔刀相助: ① 为什么有的文献里是构建含已知蛋白基因的bait载体和含cDNA文库的Prey载体,然后共转化AH109细胞;但是有的却是将两种不同的载体转入不同的酵母细胞,然后让两者进行mating,到底是哪种方法呀?(◎﹏◎) ②最后的筛选用的各种平板,如SD\-His\-Leu\-Trp 培养基,SD\-Ade\-His\-Leu\-Trp培养基原理是什么呀?搞不懂原理看一会儿就被绕晕了... |
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