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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 求助，已构建好的质粒待转入细胞内后怎样建立敲除细胞系？
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pypsak

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
向光生长: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-06-15 10:03:11
G418筛选不太好用，我们做一般是带puro的抗性，转染细胞后24后药杀，48-72小时内，先进行混合细胞检测，就是分点细胞出来做个pool检测，如果敲除效率高的话，把剩下的细胞有限稀释法做单克隆分选，得保证在72小时完成，不然单克隆就难挑了，有先稀释法你学学吧
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31楼2015-06-08 10:22:21
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向光生长

禁虫 (知名作家)
本帖内容被屏蔽
32楼2015-06-08 10:28:10
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yangjingjing

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
30楼: Originally posted by 向光生长 at 2015-06-08 09:58:44
好的，谢谢啦
...

不客气，祝你实验顺利，关键自己可不能就此打住啊
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努力打败一切
33楼2015-06-09 10:24:53
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向光生长

禁虫 (知名作家)
本帖内容被屏蔽
34楼2015-06-09 10:46:50
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yangjingjing

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
34楼: Originally posted by 向光生长 at 2015-06-09 10:46:50
嗯，谢谢啦！不抛弃，不放弃，虽然现在有点麻烦
...

偷偷告诉你，我最大的老师是试剂商~~~~所以，不要放过你身边任何的资源哦
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努力打败一切
35楼2015-06-09 16:25:24
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向光生长

禁虫 (知名作家)
本帖内容被屏蔽
36楼2015-06-10 15:29:05
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yangjingjing

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
36楼: Originally posted by 向光生长 at 2015-06-10 15:29:05
？？？？？？？啥意思...

身边的资源啊~试剂销售员也有专业性很高的
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努力打败一切
37楼2015-06-11 09:22:36
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