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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 求助，已构建好的质粒待转入细胞内后怎样建立敲除细胞系？
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向光生长

禁虫 (知名作家)
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11楼2015-05-25 14:17:59
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向光生长

禁虫 (知名作家)
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12楼2015-05-25 14:19:07
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向光生长

禁虫 (知名作家)
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13楼2015-05-25 14:20:15
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yangjingjing

木虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 向光生长 at 2015-05-25 14:20:15
荧光流式分选
...

上面不是有人说G418吗？我之前用的PLNCX2用的就是，不过RetroQ就不是。分选存在风险就是了~~~祝你好运
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努力打败一切
14楼2015-05-25 14:40:51
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向光生长

禁虫 (知名作家)
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15楼2015-05-25 15:53:49
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向光生长

禁虫 (知名作家)
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16楼2015-05-25 16:11:53
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向光生长

禁虫 (知名作家)
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17楼2015-05-25 16:18:00
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小蚂蚁虫

木虫 (著名写手)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 向光生长 at 2015-05-25 16:18:00
我没看出来什么抗性，你帮我看看呗...

pSpCas9(BB)-2A-GFP (PX458) 你用的是这个载体
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18楼2015-05-25 17:12:23
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小蚂蚁虫

木虫 (著名写手)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 向光生长 at 2015-05-25 16:18:00
我没看出来什么抗性，你帮我看看呗...

Clonal isolation of cell lines.Isolation of clonal cell lines with
specific  modifications  is  often  desired.  This  can  be  achieved
after transfection by isolating single cells through either FACS
(Steps 54–65) or serial dilutions (Steps 66–70), followed by an
expansion period to establish a new clonal cell line. It is worth
noting that cell types can vary substantially in their responses
to single-cell isolation, and literature specific to the cell type of
interest should be consulted.
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19楼2015-05-25 17:14:39
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小蚂蚁虫

木虫 (著名写手)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 向光生长 at 2015-05-25 16:18:00
我没看出来什么抗性，你帮我看看呗...

你看看这个就可以了 你是做cas-9的吧!
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  • 附件 1 : Genome_engineering_using_the_CRISPR-Cas9_system.pdf
    • 2015-05-25 17:16:37, 1.67 M
20楼2015-05-25 17:17:23
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