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向阳坊

铜虫 (正式写手)

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专业: 蛋白质组学

[交流] 蛋白提取时，TCA和丙酮的作用是什么？

用三氯乙酸和丙酮提取蛋白时，TCA和丙酮的作用分别是什么？

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1楼 2008-07-16 09:18:21

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mever

木虫 (正式写手)

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虫号: 64406
注册: 2005-04-16
专业: 植物结构学

丙酮在提取蛋白质中的主要作用是通过有机溶剂破坏蛋白质的水化层，降低介电常数增强带电蛋白质分子的相互作用，促进蛋白颗粒的聚集沉淀。
丙酮要求低温操作且尽量缩短时间避免蛋白变性。

TCA的作用主要是：
TCA在酸性条件下可与蛋白质形成不溶性盐.
同时作为蛋白质变性剂使蛋白质构象发生改变, 暴露出较多的疏水性基团, 使之聚集沉淀。
但是TCA可能渗入蛋白质分子内部而使之较难被完全除去, 在电泳前样品加热处理时可能使蛋白质结构发生酸水解而形成碎片, 所以在提取大分子蛋白质时要使用丙酮尽量将TCA抽提干净。