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phytoman

银虫 (小有名气)

[交流] 外植体共培养过程中死亡原因!

我是做农杆菌介导的遗传转化的,但是在除菌过程中外植体死亡。
我用的是ATCC15834,侵染了1h,使用1/2M+头孢霉素500mg/L除菌。恳请朋友们多多帮忙。
我是金币不多,先谢谢大家!

[ Last edited by phytoman on 2008-7-15 at 14:39 ]
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zuolili213

铁杆木虫 (正式写手)


phytoman(金币+1,VIP+0):谢谢兄弟!
同意楼上说的,应该是侵染时间太长了,我们侵染叶片一般在10min左右,根据不同的外植体材料侵染时间不同,但侵染1h时间可能是太长了
坚持就是胜利!
6楼2008-07-18 11:12:35
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游侠892

铁杆木虫 (著名写手)


phytoman(金币+1,VIP+0):谢谢兄弟指点
你是转化的什么材料啊,是不是材料本身就很容易死亡呢,或是材料对农杆菌过于敏感,共培养才1小时就死亡确实不可思议。共培养时间要大于16小时才有可能被转化哦,你说的1小时不会是侵染1小时吧?
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索
2楼2008-07-15 13:00:43
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phytoman

银虫 (小有名气)

谢谢兄弟指点,的确我说的是侵染1h。我的材料是百里香
3楼2008-07-15 14:39:13
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swallowhehe


phytoman(金币+1,VIP+0):谢谢兄弟!
我认为你要先试试你用的植物材料对该抗生素的敏感性啊。我做的是唇形科植物,选择培养用的是200mg/L的头孢
4楼2008-07-17 14:50:50
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