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biogefart

木虫 (著名写手)

[交流] pEGFPN1的GFP荧光蛋白可以在大肠杆菌中表达吗?

看到这个质粒的说明书提示是优化了密码子有利于在真核表达的,不知道会不会影响在大肠杆菌中的表达?或者GFP根本就不能在大肠表达?

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闹太套
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charlies929

至尊木虫 (正式写手)

我就是通过PCR手段,把GFP基因扩增后,通过基因工程手段构建pET-28a重组质粒,转到BL21表达就可以了,而且表达产率还蛮高的
5楼2008-07-17 08:35:47
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zcslzf

捐助贵宾 (小有名气)

最好直接问问提供质粒的单位或个人;可以根据它的编码序列在ncbi上做做它的相对表达普的分析,那个工具就是根据密码子的偏好性设计的;真不行直接表达一下试试不久行了,反正大肠杆菌的也很好做.
2楼2008-07-15 16:10:22
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charlies929

至尊木虫 (正式写手)

肯定可以表达

你就通过PCR把EGFP转到BL21里,肯定可以表达的,而且产率很高的,我刚好做过的
3楼2008-07-16 16:19:53
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biogefart

木虫 (著名写手)

谢谢三楼!

没有表达清楚可能, 我问的是这个基因是否可以表达,而不是这个质粒。
闹太套
4楼2008-07-16 17:01:44
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