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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » pEGFPN1的GFP荧光蛋白可以在大肠杆菌中表达吗？
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biogefart

木虫 (著名写手)

[交流] pEGFPN1的GFP荧光蛋白可以在大肠杆菌中表达吗？

看到这个质粒的说明书提示是优化了密码子有利于在真核表达的，不知道会不会影响在大肠杆菌中的表达？或者GFP根本就不能在大肠表达？

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闹太套
1楼 2008-07-14 20:49:19
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zcslzf

捐助贵宾 (小有名气)
最好直接问问提供质粒的单位或个人;可以根据它的编码序列在ncbi上做做它的相对表达普的分析,那个工具就是根据密码子的偏好性设计的;真不行直接表达一下试试不久行了,反正大肠杆菌的也很好做.
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2楼2008-07-15 16:10:22
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charlies929

至尊木虫 (正式写手)

肯定可以表达

你就通过PCR把EGFP转到BL21里，肯定可以表达的，而且产率很高的，我刚好做过的
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3楼2008-07-16 16:19:53
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biogefart

木虫 (著名写手)

谢谢三楼！

没有表达清楚可能， 我问的是这个基因是否可以表达，而不是这个质粒。
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闹太套
4楼2008-07-16 17:01:44
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charlies929

至尊木虫 (正式写手)
我就是通过PCR手段，把GFP基因扩增后，通过基因工程手段构建pET-28a重组质粒，转到BL21表达就可以了，而且表达产率还蛮高的
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5楼2008-07-17 08:35:47
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