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行军蚁

银虫 (小有名气)

[求助] 求大神赐教ABTS和DPPH的配置详细方法已有1人参与

我要测皂苷的抗氧化能力,需要用到ABTS、DPPH,但是不知道如何配置,求详细配置步骤以及注意事项。谢谢!急急急!!!
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wendyend

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by shenyingbin at 2015-05-12 16:54:22
方法:140 mmol/L过硫酸钾溶液440μL与7mmol/L ABTS+溶液25 mL混合,避光反应12-16小时,用乙醇稀释ABTS+溶液至吸光值为0.7±0.002,取4.9mL ABTS+溶液与0.1 ml样品混合,反应10min,测定734 nm下吸光度。以溶于甲醇 ...

你好,我也是用这种方法配制abts储备液的,可是放置了十几小时后,感觉有沉淀,而且用无水乙醇稀释后,吸光值一直下降,请问是什么原因呢?我看到有的文献的浓度是7mmol/L ABTS与2.45mmol/L过硫酸钾等体积混合制成储备液的,请问我的方法中过硫酸钾浓度是不是太高了?
6楼2016-12-10 10:27:17
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行军蚁

银虫 (小有名气)

知道的大婶快来呀,我还会继续追加金币
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2楼2015-05-12 15:52:21
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shenyingbin

铁杆木虫 (著名写手)

海猫

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
行军蚁: 金币+100, ★★★★★最佳答案 2015-05-12 20:28:51
方法:140 mmol/L过硫酸钾溶液440μL与7mmol/L ABTS+溶液25 mL混合,避光反应12-16小时,用乙醇稀释ABTS+溶液至吸光值为0.7±0.002,取4.9mL ABTS+溶液与0.1 ml样品混合,反应10min,测定734 nm下吸光度。以溶于甲醇的Trolox溶液标样作标准曲线,样品抗氧化能力用TEAC表示,空白为0.1 ml甲醇,得到清除率(y)与Trolox含量(x)之间的回归方程。
公式:清除率=(A0-A)/A0×100%
A0为未加样品的ABTS液的吸光值;A为样品与ABTS液反应后的吸光值。
DPPH 溶液的配制:准确称取7.88mg DPPH 用无水乙醇溶解,定容于100mL 容量瓶中,摇匀,配制为浓度2 ×10-4mol /L 的溶液,保存于冰箱中,备用。
通常的抗氧剂样品溶液在实验条件下均几乎无色,对DPPH 的测量不形成干扰,一般采用Larrauri 等[8]和Yokozawa 等[9]的方法进行研究。但植物提取物中化学成分复杂,可能干扰吸光度的测定。因此,本实验参考杨怀霞等[10]和郭亚力等[11]的方法并进行改进,采用该法研究提取物的抗氧化活性可排除干扰。向2.5mLDPPH 的乙醇溶液中加入1mL 样品,混合均匀,30min 后用分光光度计在517nm 波长处测定吸光度Ai,同时测定2.5mL DPPH 的乙醇溶液与 1.0mL 80%乙醇溶液混合液的吸光度AC 及2.5mL 乙醇与1.0mL 样品混合液的吸光度Ab,计算清除率。
既往不恋,纵情向前!
3楼2015-05-12 16:54:22
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行军蚁

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by shenyingbin at 2015-05-12 16:54:22
方法:140 mmol/L过硫酸钾溶液440μL与7mmol/L ABTS+溶液25 mL混合,避光反应12-16小时,用乙醇稀释ABTS+溶液至吸光值为0.7±0.002,取4.9mL ABTS+溶液与0.1 ml样品混合,反应10min,测定734 nm下吸光度。以溶于甲醇 ...

谢谢,手机上没办法送金币,晚点电脑上来

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
一路走走看看,赏那花开花落
4楼2015-05-12 19:41:39
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